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小叶子92

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助做过miRNA功能分析的大神们,如何对一个未知功能的新的miRNA进行分析?

额。。刚入门的小白,我要做的是昆虫中的miR-927a,但是查了之后发现没有人做过功能研究,在其他物种中也没有人做过,没法参考。。像这种miRNA,我该如何着手做呢?
我现在有一个大致的步骤:1 对这个miRNA进行靶基因预测,
                                          2 进行qrt-PCR分析miRNA表达量,
                                          3 进行靶基因3‘UTR荧光素酶告基因的检测
           我现在的问题是:我要做的是对miRNA 的功能进行验证,是否需要进行miRNA mimics或inhibitor的处理? 如果需要这一步的话是在荧光素酶检测之前还是之后?但是用模拟物处理的话好像还需要知道作用的靶基因才行,如果需要知道靶基因的功能,是否需要进行GO通路分析?
                现在最大的问题就是是否需要进行GO通路分析来确定靶基因,还有就是希望能帮我看看我的步骤是否需要完善.
   谢谢大家!!!
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小叶子92

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小逍遥人 at 2015-07-07 15:37:56
你这个是想自己做还是?1 对这个miRNA进行靶基因预测,进行q-PCR分析miRNA表达量,
2:靶基因鉴定:报告基因
3:3‘RACE 确定起始位点
4:chip-seq

我是打算自己做。我看第四步还挺复杂的,这个自己做可行吗?
7楼2015-07-09 09:38:29
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小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪

你这个是想自己做还是?1 对这个miRNA进行靶基因预测,进行q-PCR分析miRNA表达量,
2:靶基因鉴定:报告基因
3:3‘RACE 确定起始位点
4:chip-seq
生命还需要奇迹来衬托
2楼2015-07-07 15:37:56
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小逍遥人 at 2015-07-07 15:37:56
你这个是想自己做还是?1 对这个miRNA进行靶基因预测,进行q-PCR分析miRNA表达量,
2:靶基因鉴定:报告基因
3:3‘RACE 确定起始位点
4:chip-seq

请问后两个步骤干嘛?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-07-08 20:22:10
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小叶子92

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小逍遥人 at 2015-07-07 15:37:56
你这个是想自己做还是?1 对这个miRNA进行靶基因预测,进行q-PCR分析miRNA表达量,
2:靶基因鉴定:报告基因
3:3‘RACE 确定起始位点
4:chip-seq

请问第三步跟第四部是什么意思?刚开始学,,都不懂
5楼2015-07-09 09:35:44
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