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植物miRNA干扰载体构建的大体流程 已有2人参与
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| 各位大神，帮忙介绍一下植物miRNA干扰载体构建的大体流程，急求.............................. |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-07-30 00:59:06
Lopick: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-30 10:29:20
Lopick: 金币+1 2014-08-24 16:38:13
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Lopick: 金币+1 2014-08-24 16:38:13
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1. 确定并合成你所要用的miRNA序列 2. 选择适当的植物病毒载体（一般慢病毒的感染效率会比较高），载体最好带有抗性基因/标记基因以便你在感染植物细胞以后可以进行筛选感染成功的细胞 3. 将miRNA克隆到病毒载体中，和普通的克隆方法是一样的，提取病毒质粒 4. 选择你的病毒载体相应的packaging cell line，转染packaging cells 5. 收集病毒上清液，浓缩病毒颗粒，就可以用来感染植物细胞了 6. 感染植物细胞以后，可以通过抗性基因来筛选感染成功的细胞，也可以通过标记基因(如荧光标记GFP)用流式来筛选感染成功的细胞 |
2楼2014-07-29 19:40:41
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3楼2014-07-31 17:52:37
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
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4楼2014-08-01 10:23:59
5楼2014-08-24 16:39:37
木欣欣60
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6楼2015-03-27 15:26:16
