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yufeiwaner

新虫 (小有名气)

[求助] 哺乳动物未完全降解RNA/DNA的研究方法

虫友们,小弟所在的实验室采集得到死亡12小时的海豚组织样品,提取了几次总RNA,发现RNA已经降解,28S和18S条带都看不到。小弟有个想法是依然反转RNA,然后设计PCR产物为100-150bp的引物做基因克隆,不知行不行?另外想请教虫友们:RNA降解的是从5’和3’开始的么?会不会从中间开始断裂降解?
另外海豚的DNA降解不严重,想用简并引物进行PCR,但有同学说这样做出来的基因序列不靠谱,小弟是菜鸟一枚,想请教各位前辈,用cDNA和DNA扩增出来的序列有多大不同?主要是因为内含子的存在么?内含子一般在保守区含量大不大?
感谢虫友们的关注和解答!

哺乳动物未完全降解RNA/DNA的研究方法
图1DNA.jpg


哺乳动物未完全降解RNA/DNA的研究方法-1
图2RNA.jpg
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