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免疫染色中的固定问题
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| 刚刚接触免疫染色，总是染不上颜色，大家给看看是什么原因：1 染色的组织（很小）在活体内非常软，即使剖出来形态也不好易扭曲，所以，我都是先用多聚甲醛固定1h-3h，固定完后，组织变硬，形态也特别好看。所以我想问的是，固定后的组织是否交联程度较强，从而把 抗原封闭而导致不能染上色的？看到有人说要抗原修复，如果用高温修复，那么蛋白质不是变性了吗？变性后的抗原还能跟抗体结合吗？2 在加入1抗和2抗反应时，应该在低温还是高温反应呢？抗体一般保存在低温中，如果高温会不会也变性呢，从而不能结合乃至染色？请各位虫友指教。 |
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