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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 昨天做转化，BL21培养，结果长了很大一片，根本无法挑菌
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我是丫丫

木虫 (正式写手)

[求助] 昨天做转化，BL21培养，结果长了很大一片，根本无法挑菌 已有6人参与

无法挑菌，该怎么办？是不是抗生素抗性不行？
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一颗自由的心不知是被身体束缚还是梦想
1楼 2015-06-05 09:27:05
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wadecao

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我是丫丫: 金币+2 2015-06-05 12:28:15
本帖内容被屏蔽
2楼2015-06-05 11:11:16
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分两步走，一、继续转点、挑菌扩增培养到抗性斜面上，正常考察发酵水平；
二、重新转化
转化效率高的话，也可能出现很多抗性菌的，当然也不排除假阳性的可能。
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青春留不住，白发自然生！
4楼2015-06-05 13:22:26
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普通回帖

我是丫丫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wadecao at 2015-06-05 11:11:16
重新转化，涂平板的时候少涂点，按你之前量的五分之一到十分之一就可以了。

我是稀释20倍重新涂板，先看看效果~有没有可能是抗生素失效啊
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一颗自由的心不知是被身体束缚还是梦想
3楼2015-06-05 12:28:55
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wadecao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2015-06-05 13:25:07
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1029312445

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用的什么抗生素，抗生素的半衰期一般很短，如果用之前放在室温时间长了很可能会失效的。
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6楼2015-06-06 07:21:20
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我是丫丫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 1029312445 at 2015-06-06 07:21:20
你用的什么抗生素，抗生素的半衰期一般很短，如果用之前放在室温时间长了很可能会失效的。

氯霉素，一直放在-20避光保存的

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一颗自由的心不知是被身体束缚还是梦想
7楼2015-06-06 12:25:22
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

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多涂两下，可能抗性失效。

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8楼2015-06-06 12:31:08
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rodickholm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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抗生素失效，全新做板。

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9楼2015-06-06 13:08:27
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zeroon

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
无菌水把这些菌都洗下来，再稀释梯度涂一次板，多稀释几个梯度涂，就可以挑了
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10楼2015-06-06 13:28:13
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