应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 如果目的片段过于短小克隆到PET载体上然后在BL21中表达，能表达出我的目的蛋白吗？
161/1返回列表
查看: 1234  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

风雪云

木虫 (小有名气)

[交流] 如果目的片段过于短小克隆到PET载体上然后在BL21中表达，能表达出我的目的蛋白吗？

如题，我想做个克隆，但是目的片段表达出来的蛋白（肽段）只有十几个氨基酸,假如我把这个目的片段克隆到PET载体上然后在BL21中表达，能表达出我的目的蛋白吗？如果能表达出来会不会降解呢？这么短是不是让公司合成比较靠谱啊？求教啊！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2015-05-26 22:16:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
风雪云: 金币+1 2015-05-27 23:50:05
让公司来做合成把，简单
赞一下 回复此楼
2楼2015-05-27 08:47:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erland21411

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
风雪云: 金币+1 2015-05-27 23:50:19
十几个氨基酸还是合成吧，你做原核表达的话这个太小了很难区分和纯化的，不如直接合成的效果好。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-27 09:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by erland21411 at 2015-05-27 09:08:54
十几个氨基酸还是合成吧，你做原核表达的话这个太小了很难区分和纯化的，不如直接合成的效果好。

谢谢
回复此楼
4楼2015-05-27 10:18:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
风雪云: 金币+1 2015-05-27 23:50:28
只要载体宿主没有问题，优化表达条件，然后在原核蛋白表达中的成功率还是蛮高的，只是纯化时很难分离开，顶多用HPLC，一般你这个多肽用化学合成比较划算
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-27 10:36:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mataomatao

禁虫 (正式写手)
★
风雪云: 金币+1 2015-05-27 23:51:51
本帖内容被屏蔽
6楼2015-05-27 19:45:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-05-27 10:36:45
只要载体宿主没有问题，优化表达条件，然后在原核蛋白表达中的成功率还是蛮高的，只是纯化时很难分离开，顶多用HPLC，一般你这个多肽用化学合成比较划算...

这么短在原核中表达中能高吗？如果表达量很低不那就什么都纯化不出来吧
赞一下 回复此楼
7楼2015-05-27 23:51:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mataomatao at 2015-05-27 19:45:36
最好连标签，之后切；这样的蛋白在神马宿主表达，这个需要筛选。。。。。。木有人能预测

能表达出来吗
回复此楼
8楼2015-05-27 23:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 风雪云 at 2015-05-27 23:51:25
这么短在原核中表达中能高吗？如果表达量很低不那就什么都纯化不出来吧...

这个要看实际情况了，以前我老师做过这么小的，的确表达量很低，不好纯化。不过用HPLC多少还能纯化出来（当然纯度就完了），所以他后来改用的化学合成。。。
赞一下 回复此楼
15楼2015-05-28 09:04:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mataomatao

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
16楼2015-05-28 10:37:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
dmbb9楼
2015-05-27 23:57   回复  
风雪云(金币+1): 谢谢参与
jixiangbao10楼
2015-05-28 00:10   回复  
风雪云(金币+1): 谢谢参与
Jameskelly11楼
2015-05-28 00:13   回复  
风雪云(金币+1): 谢谢参与
mtw92212楼
2015-05-28 00:14   回复  
风雪云(金币+1): 谢谢参与
syhorchid13楼
2015-05-28 00:19   回复  
风雪云(金币+1): 谢谢参与
gorgan14楼
2015-05-28 05:15   回复  
风雪云(金币+1): 谢谢参与
祝福 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
相关版块跳转 我要订阅楼主 风雪云 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +5 礼堂丁真258 2026-02-28 7/350 2026-03-01 19:12 by Js512888
[考研] 0857调剂 +3 一ll半 2026-02-28 3/150 2026-03-01 18:32 by 热情沙漠
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:11 by 海嵙Y
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 0856求调剂285 +8 吕仔龙 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by 刘兵
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭