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如果目的片段过于短小克隆到PET载体上然后在BL21中表达,能表达出我的目的蛋白吗?
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风雪云
木虫
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[交流]
如果目的片段过于短小克隆到PET载体上然后在BL21中表达,能表达出我的目的蛋白吗?
如题,我想做个克隆,但是目的片段表达出来的蛋白(肽段)只有十几个氨基酸,假如我把这个目的片段克隆到PET载体上然后在BL21中表达,能表达出我的目的蛋白吗?如果能表达出来会不会降解呢?这么短是不是让公司合成比较靠谱啊?求教啊!
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2015-05-26 22:16:05
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恶魔的左眼
木虫
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7楼
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Originally posted by
风雪云
at 2015-05-27 23:51:25
这么短在原核中表达中能高吗?如果表达量很低不那就什么都纯化不出来吧...
这个要看实际情况了,以前我老师做过这么小的,的确表达量很低,不好纯化。不过用HPLC多少还能纯化出来(当然纯度就完了),所以他后来改用的化学合成。。。
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15楼
2015-05-28 09:04:57
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a13515517892
木虫
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风雪云: 金币+1
2015-05-27 23:50:05
让公司来做合成把,简单
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2楼
2015-05-27 08:47:23
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erland21411
铁虫
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风雪云: 金币+1
2015-05-27 23:50:19
十几个氨基酸还是合成吧,你做原核表达的话这个太小了很难区分和纯化的,不如直接合成的效果好。
[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼
2015-05-27 09:08:54
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风雪云
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3楼
:
Originally posted by
erland21411
at 2015-05-27 09:08:54
十几个氨基酸还是合成吧,你做原核表达的话这个太小了很难区分和纯化的,不如直接合成的效果好。
谢谢
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4楼
2015-05-27 10:18:50
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gorgan
14楼
2015-05-28 05:15
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风雪云(金币+1): 谢谢参与
祝福
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