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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 限制性内切酶选择
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fMssop

新虫 (初入文坛)

[求助] 限制性内切酶选择已有4人参与

我们知道，并不是所有的限制性内切酶可以一起进行双酶切，因为有些酶切位点会两两结合，形成新的位点并且这个新位点不能被任何酶再次切开，例如：Sal I和Xho I .我想知道还有没有更多这样的酶组合，以便日后实验避开。 还有一问就是，菌液PCR结果成阳性，但是之后提取质粒，进行酶切验证却是阴性，请问这是什么原因呢??
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1楼2015-05-19 21:08:59
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fMssop

新虫 (初入文坛)
自顶！d=====(￣▽￣*)b
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2楼2015-05-19 21:20:20
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shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
双酶切后再连接，完事切不开了，这种就是同尾酶，具体你可以百度你会有很多！

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-05-20 00:59:58
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mataomatao

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
4楼2015-05-21 20:56:15
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feng890327

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fMssop: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-05-22 20:01:22
还有很多种这样的组合，也就是同尾酶，比如BglII和BamHI，NheI和XbaI等等，以后如果想避开，你在用之前最好看下两种酶切割后的粘性末端是否相同，如果一样的话就不能在一起用，如果非要用的话，做一下负对照或者对载体进行去磷酸化处理
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5楼2015-05-22 14:05:15
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gufeng2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议酶切验证为主。
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6楼2015-05-22 14:58:28
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