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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于限制性内切酶的识别位点的问题！！！
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站着别动君

新虫 (小有名气)

[交流] 关于限制性内切酶的识别位点的问题！！！ 已有7人参与

我要构建一个质粒，但载体上NcoI和KpnI酶切位点有重叠公用之间的GG，那么如果单酶切后会破坏其中一个酶的识别位点，再用另一个酶切还能切开么？

关于限制性内切酶的识别位点的问题！！！
NcoI.png


关于限制性内切酶的识别位点的问题！！！-1
KpnI.png
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1楼 2014-10-28 11:18:26
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站着别动君

新虫 (小有名气)
求顶啊！！！
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2楼2014-10-28 11:27:31
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lidonghong

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
能，应该是不影响的，或者你可以同时进行双酶切。
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生物化学与分子生物学
3楼2014-10-28 11:40:04
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-31 23:20:04
觉得应该不能了，为什么要选择这种让自己纠结的位点啊？？换一个酶切位点可以不？
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4楼2014-10-28 17:25:46
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得也够呛，换一个吧···
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···
5楼2014-10-28 17:31:36
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xq0712105025

木虫 (著名写手)

qq
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该不会，质粒基因组不大，二者位点靠在一块的概率也不大，可以试试
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yo
6楼2014-10-28 19:11:26
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oaixlittle

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的意思是序列是CCATGGTACC?
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7楼2014-10-28 19:19:07
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站着别动君

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by oaixlittle at 2014-10-28 19:19:07
你的意思是序列是CCATGGTACC?

嗯，是的。果断换位点了。。(≧▽≦)

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8楼2014-10-28 20:15:25
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cuihao102

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 站着别动君 at 2014-10-28 20:15:25
嗯，是的。果断换位点了。。(≧▽≦)
...

换了是明智的选择，分步酶切破坏另一个酶切位点，同时酶切会有位阻
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9楼2014-10-28 21:01:05
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ncuduhan

银虫 (正式写手)
为啥要给自己找麻烦呢。。。。

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10楼2014-10-29 00:10:54
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