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上弦月aq

铁虫 (小有名气)

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[求助] 酪蛋白酰化度茚三酮法蛋白质含量已有1人参与

请问有人做过酪蛋白与琥珀酸酰化度的测定吗？或者做过类似的酰化度测定。只要回答者对我有用我都会赠送金币！！！我用的茚三酮法。酪蛋白对照的浓度为0.1mg/ml，称取10mg酪蛋白到100ml量瓶中，加10ml0.02mol/L的氢氧化钠溶液摇晃使完全溶解后，加UP水定容。然后取1ml酪蛋白对照溶液到10ml量瓶中，再加入2ml磷酸盐缓冲液（PH=6.，磷酸二氢钾680mg,氢氧化钠94mg, 加水溶解并定容到100ml，即得）,然后加入1ml茚三酮溶液（200mg到10ml棕色量瓶，加无水乙醇溶解定容。避光），摇匀，放沸水中水浴15min.空白对照为用1ml水，2ml磷酸盐缓冲液，然后加入1ml茚三酮溶液，摇匀，放沸水中水浴15min.发现空白和酪蛋白对照均显蓝紫色，紫外在570nm处扫描得吸光度均为0.3左右。于是怀疑茚三酮有问题，它是天津公司的，砂砾状，黄色。买的新的阿拉丁的是米白色或淡黄色，粉末！但是同样操作后发现，空白和对照都不显蓝紫色，水浴后均为深黄色或者茶色。请问有人做过类似试验吗？除了茚三酮法还有别的方法测酰化度吗？

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