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上弦月aq

铁虫 (小有名气)

[求助] 酪蛋白 酰化度 茚三酮法 蛋白质含量 已有1人参与

请问有人做过酪蛋白与琥珀酸酰化度的测定吗?或者做过类似的酰化度测定 。只要回答者对我有用我都会赠送金币!!!我用的茚三酮法。酪蛋白对照的浓度为0.1mg/ml,称取10mg酪蛋白到100ml量瓶中,加10ml0.02mol/L的氢氧化钠溶液摇晃使完全溶解后,加UP水定容。然后取1ml酪蛋白对照溶液到10ml量瓶中,再加入2ml磷酸盐缓冲液(PH=6.,磷酸二氢钾680mg,氢氧化钠94mg, 加水溶解并定容到100ml,即得),然后加入1ml茚三酮溶液(200mg到10ml棕色量瓶,加无水乙醇溶解定容。避光),摇匀,放沸水中水浴15min.空白对照为用1ml水,2ml磷酸盐缓冲液,然后加入1ml茚三酮溶液,摇匀,放沸水中水浴15min.发现空白和酪蛋白对照均显蓝紫色,紫外在570nm处扫描得吸光度均为0.3左右。于是怀疑茚三酮有问题,它是天津公司的,砂砾状,黄色。买的新的阿拉丁的是 米白色或淡黄色,粉末!但是同样操作后发现,空白和对照都不显蓝紫色,水浴后均为深黄色或者茶色。请问有人做过类似试验吗?除了茚三酮法还有别的方法测酰化度吗?
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zzssqq2004

木虫 (著名写手)

目前还没有
上善若水
2楼2015-05-17 16:16:02
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上弦月aq

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zzssqq2004 at 2015-05-17 16:16:02
目前还没有

是说没有别的方法测酰化度吗?你是不是做过此方法?
3楼2015-05-17 17:18:13
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宁宁9152

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问你这个问题最后得到解决了吗?我现在也要测定琥珀酰化酪蛋白的酰化度,求方法
4楼2016-03-21 09:52:44
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