应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB实验有非特异结合
41/1返回列表
查看: 676  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

douglaspei

金虫 (正式写手)

[求助] WB实验有非特异结合 已有1人参与

今天做的WB实验，泳道里有很多非特异结合，请高手指教。

WB实验有非特异结合
C,27Q,28E,MS,29L,29T,33K,44E,MS,46T,46V,56S,61R,64P,72W-150516A.jpg


WB实验有非特异结合-1
C,27Q,28E,MS,29L,29T,33K,44E,MS,46T,46V,56S,61R,64P,72W-150516B.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-05-16 17:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhsina123

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
douglaspei: 金币+1, ★有帮助 2015-05-21 14:33:57
个人觉得可以考虑几个问题：
一抗孵育后，是否已经使用TBST充分洗脱？
一抗的特异性如何？是多抗还是单抗？
二抗杂交后是否洗脱充分？

看到膜上有许多泡泡，转膜时应该赶去泡泡，避免气泡阻碍蛋白转膜。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-05-16 18:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

douglaspei

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhsina123 at 2015-05-16 18:33:21
个人觉得可以考虑几个问题：
一抗孵育后，是否已经使用TBST充分洗脱？
一抗的特异性如何？是多抗还是单抗？
二抗杂交后是否洗脱充分？

看到膜上有许多泡泡，转膜时应该赶去泡泡，避免气泡阻碍蛋白转膜。

谢谢您的回复，
1. 我用的是金斯瑞的试剂盒，在一抗与目的蛋白结合前，先孵育一抗和二抗。
2. 一抗之前做过，特异性还不错。
3. 抗体孵育后洗的比较充分，只有两张膜叠在一块洗的，如果有影响也应该是下面那一张。
4. 试剂盒过期两周了，个人觉得是不是封闭液坏了，导致抗体与所有蛋白结合。
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-17 13:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

douglaspei

金虫 (正式写手)
另外，在半干转的过程中，将电泳后的胶向膜上转移时，容易弄碎胶，且不易与膜对整，不知道没有没什么好的方法，谢谢！
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-17 13:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 douglaspei 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭