24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 2304  |  回复: 7

星乐之梦

新虫 (初入文坛)

[求助] 惊呆了,自杀质粒不自杀了 已有2人参与

之前一直在做基因中断的一些实验,采用的载体质粒为PDS3.0是一种自杀质粒,含有庆大抗性,在Nacl-less LB中摇床培养十几个小时会自动消除。但最近两个月不知怎么的,自杀质粒就是摇不掉,受体菌仍有庆大抗性而且P不出条带。请各位大神指教一二。谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongdong85

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,我是中国科学技术大学的学生,我用pre112(类似于pDS3.0)敲除基因,也碰到了你相同的问题,不知道你解决了没有,还请多多指教。打搅了。我的邮箱:dfl@mail.ustc.edu.cn
加油,努力
2楼2015-09-24 15:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星乐之梦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dongdong85 at 2015-09-24 15:06:50
你好,我是中国科学技术大学的学生,我用pre112(类似于pDS3.0)敲除基因,也碰到了你相同的问题,不知道你解决了没有,还请多多指教。打搅了。我的邮箱:dfl@mail.ustc.edu.cn

目前我已经不用这个中断系统了,不过还是建议你重新接菌抽取该质粒,培养条件严格按照要求来,时间可以长一些,祝你成功!
3楼2015-09-24 16:48:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongdong85

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 星乐之梦 at 2015-09-24 16:48:56
目前我已经不用这个中断系统了,不过还是建议你重新接菌抽取该质粒,培养条件严格按照要求来,时间可以长一些,祝你成功!...

谢谢你的回复,你觉得可能是质粒的原因是吧,因为你开始用是没有问题的,不知道最后你怎么解决自杀质粒不自杀了这个问题的。我现在碰到的问题是第一次重组克隆在蔗糖平板上能够生长,不知道是不是这个质粒在这个细菌不能用?
加油,努力
4楼2015-09-29 17:08:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星乐之梦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dongdong85 at 2015-09-29 17:08:47
谢谢你的回复,你觉得可能是质粒的原因是吧,因为你开始用是没有问题的,不知道最后你怎么解决自杀质粒不自杀了这个问题的。我现在碰到的问题是第一次重组克隆在蔗糖平板上能够生长,不知道是不是这个质粒在这个细 ...

这个质粒在大肠中能用这个没有问题,后期可能是某些因素导致其蔗糖的敏感性丧失,建议重新接菌抽质粒。
5楼2015-09-30 08:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuyuanqing

金虫 (正式写手)

是不是复制子出问题了?测个序?

发自小木虫Android客户端
6楼2015-09-30 14:52:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

兰伊水月

新虫 (小有名气)

楼主,可以分享一点PDS3.0质粒吗?
7楼2017-03-03 15:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

我们那个庆大也是,以前摇几次就没了,现在就是掉不了
···
8楼2017-03-03 15:48:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 星乐之梦 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +7 小聂爱学习 2026-04-11 10/500 2026-04-14 01:37 by wulijun2012
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +8 xu@841019 2026-04-11 9/450 2026-04-13 21:36 by xu@841019
[考研] 生物医药调剂|SCI中科院三区一作+多项科研成果 +9 likangxing 2026-04-07 12/600 2026-04-13 21:35 by 崆峒药童
[考研] 复试调剂 +17 积极向上; 2026-04-10 19/950 2026-04-13 19:53 by 闲人终南山
[考研] 245求调剂 +3 冰糖橘?汽水 2026-04-13 7/350 2026-04-13 16:42 by 冰糖橘?汽水
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 22408 352分求调剂 +5 努力的夏末 2026-04-09 5/250 2026-04-12 19:17 by wj165256
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 281求调剂 +11 觉得好的吧 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:35 by 逆水乘风
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 一志愿211,化学310分,本科重点双非,求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 071000生物学调剂求助 +17 zzzzwww 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 15:55 by 求调剂zz
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 278求调剂 +27 范婷娜 2026-04-07 31/1550 2026-04-09 20:49 by zhouxiaoyu
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 0703化学求调剂 +21 不知名的小卅 2026-04-08 21/1050 2026-04-09 18:55 by l_paradox
[考研] 考研调剂 +13 冰冰,,, 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
信息提示
请填处理意见