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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 万能的木虫啊，告诉我ELISA 蛋白包被优化条件
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)

[交流] 万能的木虫啊，告诉我ELISA 蛋白包被优化条件

最近楼主在徒手包被蛋白检测ELISA，从结果来看可能是蛋白包被效果太差。各位虫子分享一下你们包被蛋白的经验，主要是用的什么包被缓冲液和包被条件。谢谢~谢谢~
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1楼 2015-05-11 12:36:48
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yy122465518

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
之前我一直用20mm的PH 9.6的CB缓冲稀释包被，不行就换PBS包被呗
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8楼2015-05-12 11:13:41
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feiyue122

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般都是用0.05M的碳酸换成溶液作为包被液的。
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13楼2015-12-14 11:06:10
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主是用来做定量还是做结合活性。定量包被的蛋白要过量，结合活性包被的蛋白需要少量。一般包被条件是PBS或者碳酸钠，碳酸氢钠缓冲液PN9.6 4度过夜。蛋白的亲水疏水不一样，需要选择不同的酶标板条，亲水或者疏水涂层的酶标板
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蛋白小王子6
15楼2015-12-15 22:13:11
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-15 22:13:11
楼主是用来做定量还是做结合活性。定量包被的蛋白要过量，结合活性包被的蛋白需要少量。一般包被条件是PBS或者碳酸钠，碳酸氢钠缓冲液PN9.6 4度过夜。蛋白的亲水疏水不一样，需要选择不同的酶标板条，亲水或者疏水涂 ...

yyy0305你好 我是做结合活性抑制的。亲水和疏水酶标板是怎么回事？我们可以加你微信好友么？

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16楼2015-12-15 22:52:23
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yy122465518 at 2015-05-12 11:13:41
之前我一直用20mm的PH 9.6的CB缓冲稀释包被，不行就换PBS包被呗

昨天正是用PBS包被的，37℃孵育，有点效果。谢谢你哈。
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9楼2015-05-12 11:16:08
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你好青春~

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主现在包被的方法有了吗？能分享一下不？
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10楼2015-10-30 22:12:39
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 你好青春~ at 2015-10-30 22:12:39
楼主现在包被的方法有了吗？能分享一下不？

我后来尝试PBS过夜包被，有效果，重复性差。

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11楼2015-10-31 08:54:43
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你好青春~

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 蛋白小王子6 at 2015-10-31 08:54:43
我后来尝试PBS过夜包被，有效果，重复性差。
...

额，那还是做不出比较好的包被效果吗。。。
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12楼2015-11-01 09:13:35
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by feiyue122 at 2015-12-14 11:06:10
一般都是用0.05M的碳酸换成溶液作为包被液的。

你好 我们可以进一步交流么？ 我已经留了联系方式给你。

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14楼2015-12-14 22:54:54
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feiyue122

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
重复性差，有可能是你的操作稳定性不够，批间差比较大，你是单道移液器操作还是多道移液器操作呢，
除了加样品操作之外，其他的加液体最好能用多道移液器，这样操能保持操作的同步进行
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17楼2015-12-16 10:38:00
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dmbb2楼
2015-05-11 14:57   回复  
蛋白小王子6(金币+1): 谢谢参与
nono20093楼
2015-05-11 15:03   回复  
蛋白小王子6(金币+1): 谢谢参与
jixiangbao4楼
2015-05-11 15:03   回复  
蛋白小王子6(金币+1): 谢谢参与
neu2345楼
2015-05-11 15:06   回复  
蛋白小王子6(金币+1): 谢谢参与
沐-浅夏6楼
2015-05-11 15:17   回复  
蛋白小王子6(金币+1): 谢谢参与
寻找cock7楼
2015-05-11 15:28   回复  
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