24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1706  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小-罗-阳

金虫 (小有名气)

[求助] 求助各位关于IPTG诱导表达的一些问题 已有1人参与

最近在做iptg诱导表达实验,但是总是不成功,老师说可能是iptg用量的问题,我配制的iptg是24mg/ml的,锥形瓶中菌液40ml,如果想要使iptg终浓度为1mmol/L,那么我取400微升的iptg加入到锥形瓶中有什么问题吗?如果不是iptg的问题,那问题可能出在哪里?诱导温度,诱导时间方面有什么需要注意的吗,培养阶段要注意些什么?新手,不懂的好多,还请各位赐教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥?

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小-罗-阳 at 2015-05-10 15:52:31
蛋白诱导不出来,so电泳也没有条带,老师说我的iptg加太多了,但是按照我上面计算的用量没什么问题啊,实在是找不到问题所在了。...

你是取单菌落,液体过夜培养之后,第二天取过夜菌加到锥形瓶里摇到指数期,然后又加的iptg吗

[ 发自小木虫客户端 ]
现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-05-10 19:10:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥?

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不成功是什么意思,蛋白没有诱导出来吗,还是电泳没跑出来,我之前做的用BL21诱导是37度,四个小时左右,浓度我记不清楚了

[ 发自小木虫客户端 ]
现在我们能做的就是努力努力再努力
2楼2015-05-09 22:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小-罗-阳

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by halfbeer at 2015-05-09 22:59:23
不成功是什么意思,蛋白没有诱导出来吗,还是电泳没跑出来,我之前做的用BL21诱导是37度,四个小时左右,浓度我记不清楚了

蛋白诱导不出来,so电泳也没有条带,老师说我的iptg加太多了,但是按照我上面计算的用量没什么问题啊,实在是找不到问题所在了。
3楼2015-05-10 15:52:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小-罗-阳

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-05-10 19:10:45
你是取单菌落,液体过夜培养之后,第二天取过夜菌加到锥形瓶里摇到指数期,然后又加的iptg吗
...

是的,这样做没问题吧~
5楼2015-05-11 15:12:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +9 lzmk 2026-04-14 10/500 2026-04-15 20:02 by 学员JpLReM
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-14 7/350 2026-04-15 14:39 by 黑科技花岗岩
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +26 慕绝cc 2026-04-09 30/1500 2026-04-14 18:50 by 蔡苏阳
[考研] 085404 298分求调剂 +11 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 12/600 2026-04-14 08:38 by wfj257
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线,领导幸灾乐祸,教师遭殃恐 +3 qut2026 2026-04-11 7/350 2026-04-12 20:24 by qut2026
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +7 Ytyt11 2026-04-09 8/400 2026-04-12 16:57 by ajpv风雷
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线,员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 292求调剂 +9 笑笑袁 2026-04-09 9/450 2026-04-10 10:05 by LHGeng
[考研] 已调剂 +18 柴郡猫_ 2026-04-09 19/950 2026-04-09 22:10 by 柴郡猫_
[考研] 复试调剂,一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
信息提示
请填处理意见