应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 求助各位关于IPTG诱导表达的一些问题
61/1返回列表
查看: 1954  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小-罗-阳

金虫 (小有名气)

[求助] 求助各位关于IPTG诱导表达的一些问题 已有1人参与

最近在做iptg诱导表达实验，但是总是不成功，老师说可能是iptg用量的问题，我配制的iptg是24mg/ml的，锥形瓶中菌液40ml，如果想要使iptg终浓度为1mmol/L,那么我取400微升的iptg加入到锥形瓶中有什么问题吗？如果不是iptg的问题，那问题可能出在哪里？诱导温度，诱导时间方面有什么需要注意的吗，培养阶段要注意些什么？新手，不懂的好多，还请各位赐教！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-05-08 23:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不成功是什么意思，蛋白没有诱导出来吗，还是电泳没跑出来，我之前做的用BL21诱导是37度，四个小时左右，浓度我记不清楚了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
2楼2015-05-09 22:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小-罗-阳

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by halfbeer at 2015-05-09 22:59:23
不成功是什么意思，蛋白没有诱导出来吗，还是电泳没跑出来，我之前做的用BL21诱导是37度，四个小时左右，浓度我记不清楚了

蛋白诱导不出来，so电泳也没有条带，老师说我的iptg加太多了，但是按照我上面计算的用量没什么问题啊，实在是找不到问题所在了。
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-10 15:52:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小-罗-阳 at 2015-05-10 15:52:31
蛋白诱导不出来，so电泳也没有条带，老师说我的iptg加太多了，但是按照我上面计算的用量没什么问题啊，实在是找不到问题所在了。...

你是取单菌落，液体过夜培养之后，第二天取过夜菌加到锥形瓶里摇到指数期，然后又加的iptg吗

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-05-10 19:10:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小-罗-阳

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-05-10 19:10:45
你是取单菌落，液体过夜培养之后，第二天取过夜菌加到锥形瓶里摇到指数期，然后又加的iptg吗
...

是的，这样做没问题吧~
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-11 15:12:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小-罗-阳: 金币+11, ★有帮助 2015-05-13 08:11:13
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小-罗-阳 at 2015-05-11 15:12:35
是的，这样做没问题吧~...

对的，就是这么做的。那你是用的什么菌体表达的，如果是BL21的话，这么做应该没问题的。
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
6楼2015-05-11 15:36:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小-罗-阳 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 07:01 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 06:53 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:48 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:43 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 05:41 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 05:22 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 3/150 2026-11-01 04:04 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 03:59 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 10/500 2026-11-01 03:51 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 25/1250 2026-11-01 03:30 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 12/600 2026-11-01 02:19 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 12/600 2026-11-01 00:15 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[硕博家园] 越来越担心硕士毕业后没有竞争力了 +8 zuesli 2026-10-27 14/700 2026-10-30 22:44 by 好运连连公主
[基金申请] 论文的挂名怎么评判贡献？基金申请中，排名第一的挂名文章 +3 biily 2026-10-25 3/150 2026-10-30 18:33 by 旁观2020
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
[文学芳草园] 闲聊 +3 myrtle 2026-10-25 6/300 2026-10-29 15:28 by myrtle
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭