| 查看: 2934 | 回复: 1 | |||
[求助]
细胞裂解液与酶解的兼容性
|
|
本人想做的实验是将Hela细胞裂解提取蛋白后，还原烷基化胰酶酶解，最后SPE纯化后用LC-MS/MS分析。我们实验室刚好有人也在做细胞中蛋白的分析，他们使用的是RIPA强裂解液，里面的裂解成分主要是1% Triton X-100，1% 脱氧胆酸钠和0.1% SDS。不过他们提出的蛋白后面都是先跑胶的，基本不用液质分析或者也是跑完胶后再分析。 我的问题是这种RIPA裂解液适用于我的实验吗？不知道里面的表面活性剂成分会不会影响后续的酶解操作。我看文献中做后续质谱分析的大多用的含8 M尿素而不含表面活性剂的裂解液，是因为尿素也可以裂解细胞吗？尿素稀释到2 M以下就可以用Trypsin酶解，RIPA稀释后可以吗？ 尿素裂解液里面的成分较多，不少试剂还得现买。RIPA实验室有现成的，如果RIPA和后面的实验不冲突还是希望能用RIPA做了。 第一次提问，希望大家能帮忙解惑。不胜感激。 |
回复此楼» 猜你喜欢
投稿精细化工
已经有6人回复
-
博士读完未来一定会好吗
已经有36人回复
-
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？
已经有10人回复
-
导师想让我从独立一作变成了共一第一
已经有10人回复
-
博士申请都是内定的吗？
已经有9人回复
-
心脉受损
已经有8人回复
-
读博
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
原核表达提蛋白细菌裂解液为什么要冰上消化？
已经有5人回复- 求助Western Blot实验条带没出现的原因分析及解决办法
已经有7人回复
- 关于Ripa裂解液
已经有5人回复
- 微生物液氮冻融法DNA提取
已经有8人回复
- 请教有关Westen Blot抗体有关的问题
已经有16人回复
- 细胞培养基配制？
已经有5人回复
- 关于western相关试剂材料的选择（转）
已经有7人回复
- 菜鸟求助，我们在提取蛋白的时候有变性裂解液和非变性裂解液，他们有什么区别
已经有4人回复
- 组织和细胞中，膜蛋白，胞浆蛋白，核蛋白提取裂解液区别
已经有5人回复
- 细胞裂解缓冲液的配制？求助各位大虾
已经有3人回复
- 【求助/交流】请各位帮帮忙~~细胞裂解液如何保存，能保存多长时间？
已经有8人回复
- 【求助/交流】请问用RIPA裂解液裂解后的蛋白能做ELISA吗？
已经有6人回复
- 【求助/交流】质粒提取时洗脱液的选择
已经有3人回复
- Western Blot 磷酸化蛋白测定问题
已经有9人回复
2楼2018-02-06 11:08:56