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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 超滤管浓缩问题
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冰u允

铁虫 (初入文坛)

[求助] 超滤管浓缩问题 已有3人参与

我的蛋白分子量约为27KD，用millipore的超滤管10KD的浓缩，发现一点都没有浓缩，是不是选的超滤管截留量大了
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1楼 2015-04-25 22:02:57
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迷你骑士

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该不是，我64K的蛋白，10K的膜没有任何问题.你考虑一下是不是这些原因:1、蛋白buffer不适合，蛋白发生了沉淀，赌孔；2，过滤转速太低

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-04-25 22:35:36
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bolysu

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2015-04-26 15:33:25
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冰u允

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 迷你骑士 at 2015-04-25 22:35:36
应该不是，我64K的蛋白，10K的膜没有任何问题.你考虑一下是不是这些原因:1、蛋白buffer不适合，蛋白发生了沉淀，赌孔；2，过滤转速太低

我的蛋白没有堵孔，转速也对，因为在同一转速下截留量一定
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4楼2015-04-28 15:43:58
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冰u允

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bolysu at 2015-04-26 15:33:25
超滤管是不是同时起到脱盐的作用了？...

so?
5楼2015-04-28 15:44:19
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冰u允

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bolysu at 2015-04-26 15:33:25
超滤管是不是同时起到脱盐的作用了？...

so?
6楼2015-04-28 16:00:59
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chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
冰u允(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-29 18:46:58
你最后是用多少体积的水溶解的？一共加了几次样品？因为膜会粘好多蛋白，所以损失是肯定的，可能是你加的样太小，最后溶解时加的体积又太大
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人的差别在于业余时间
7楼2015-04-28 16:45:39
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冰u允

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by chibang1220 at 2015-04-28 16:45:39
你最后是用多少体积的水溶解的？一共加了几次样品？因为膜会粘好多蛋白，所以损失是肯定的，可能是你加的样太小，最后溶解时加的体积又太大

超滤离心后上层还有溶液，不需要加水溶解
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8楼2015-04-29 10:00:25
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
你好，请问你的这个浓缩的管子是在哪里买的？  最近要做浓缩，能给个厂家的联系方式吗？
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现在我们能做的就是努力努力再努力
9楼2015-10-19 09:38:58
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lilihui

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

选择的超滤管大小可以，如果没有浓缩，可能是因为浓缩管用的时间太久堵了，也可能离心力太小，浓缩时间短。离心力一般选择3900g左右，时间最短10min。
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10楼2015-10-19 14:47:43
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