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酵母载体构建问题 已有1人参与
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| 如题:最近构建酵母双杂载体,片段2K,是一个转录因子。分别构到PGAD和PGBK载体上,相同的引物PGBK载体没问题,而PGAD一直构建不成功。酶切位点没问题,也换过其他的酶切位点。测序用T7启动子测不出来,用自己的引物测出来目的片段在载体里面,目的片段也没发生突变,载体发生大量突变,换别人的新载体也是同样情况,怀疑过是转化过程中发生的突变,也换过菌株,但是还是同样情况。请各位大神指点迷津,不胜感激!金币有限,但已是全部家当。 |
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