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酵母载体构建问题 已有1人参与
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| 如题：最近构建酵母双杂载体，片段2K，是一个转录因子。分别构到PGAD和PGBK载体上，相同的引物PGBK载体没问题，而PGAD一直构建不成功。酶切位点没问题，也换过其他的酶切位点。测序用T7启动子测不出来，用自己的引物测出来目的片段在载体里面，目的片段也没发生突变，载体发生大量突变，换别人的新载体也是同样情况，怀疑过是转化过程中发生的突变，也换过菌株，但是还是同样情况。请各位大神指点迷津，不胜感激！金币有限，但已是全部家当。 |
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2楼2015-04-24 22:16:15