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wxypk

铁虫 (初入文坛)

[求助] 酵母载体构建问题 已有1人参与

如题:最近构建酵母双杂载体,片段2K,是一个转录因子。分别构到PGAD和PGBK载体上,相同的引物PGBK载体没问题,而PGAD一直构建不成功。酶切位点没问题,也换过其他的酶切位点。测序用T7启动子测不出来,用自己的引物测出来目的片段在载体里面,目的片段也没发生突变,载体发生大量突变,换别人的新载体也是同样情况,怀疑过是转化过程中发生的突变,也换过菌株,但是还是同样情况。请各位大神指点迷津,不胜感激!金币有限,但已是全部家当。
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你说的转化后载体突变,可能性几乎没有,最简单的构载体,怎么会这样,可能还有其他问题

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-04-24 22:16:15
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