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混合配搭

新虫 (小有名气)

[交流] 原生质体相关的

最近在做丝状真菌原生质体，制备时能观察到原生质体，可是再生时就没有菌落长出。再生时渗透压缓冲液还是用的MgS04•7H20，看有的文献悬浮时用的STC等渗液，在文献里看到配方为 STC：1．0 M山梨醇(Sorbitol)、10mM Tris-HCl(pH 7.5))、50 mM CaCl2，充分溶解后，定容至200 ml，121℃灭菌30 min后使用。想问一下，溶STC的溶剂是灭菌水，还是磷酸缓冲液啊？
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1楼 2015-04-14 09:27:11
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lomis

木虫 (正式写手)
★
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都是缓冲液的，因为需要保证pH.
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没有命运，只有选择！
2楼2015-04-14 09:44:06
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混合配搭

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lomis at 2015-04-14 09:44:06
都是缓冲液的，因为需要保证pH.

是用磷酸缓冲液配的STC等渗液呗？那磷酸缓冲液和这个STC等渗液，可以121度灭菌吗？还是都要用微孔滤膜过滤除菌啊

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3楼2015-04-14 13:41:26
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lomis

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
混合配搭: 金币+1 2015-04-15 08:16:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by 混合配搭 at 2015-04-14 13:41:26
是用磷酸缓冲液配的STC等渗液呗？那磷酸缓冲液和这个STC等渗液，可以121度灭菌吗？还是都要用微孔滤膜过滤除菌啊
...

都可以，我们常用的是115℃灭菌。
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没有命运，只有选择！
4楼2015-04-14 14:01:43
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混合配搭

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lomis at 2015-04-14 14:01:43
都可以，我们常用的是115℃灭菌。...

STC就是制备出原生质体后，悬浮和稀释时用，为了再生时准备，之前就用MgSO4就可以是吗

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5楼2015-04-14 14:05:50
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混合配搭

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lomis at 2015-04-14 14:01:43
都可以，我们常用的是115℃灭菌。...

还有最后离心，去上清时，你的沉淀明显吗？我的怎么看不到明显沉淀啊？

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6楼2015-04-14 14:20:52
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BOMN

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
想请问配制STC也需要用缓冲液吗

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7楼2018-12-12 23:35:34
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