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原生质体制备 溶菌酶配制 P缓冲溶液已有2人参与
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| 我现在打算做原生质体制备和融合，不知道固体的溶菌酶用什么缓冲溶液比较好，最适的PH?,还有文献里提到P缓冲溶液，不知道组分是什么？希望帮忙！多谢！ |
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 Streptomyces Bar |
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【答案】应助回帖
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（一）缓冲液 （1）0.1 mol/L 磷酸缓冲液（pH6.0），100ml 磷酸二氢钾1.5g 磷酸氢二钾3.5g （2）高渗缓冲液（10ml）；于上述缓冲液中加入0.8 mol/L甘露醇 （3）0.9%生理盐水100ml 7x4.5ml+5x4.5ml，其余装入三角瓶灭菌 （二）原生质体稳定液（SMM）100ml 0.5 mol/L蔗糖、20 mol/L MgCl2、0.02 mol/L顺丁烯二酸，调pH6.5 5x4.5ml，其余装入三角瓶灭菌 （三）溶菌酶液 用SMM溶液配制，终浓度为1mg/ml,过滤除菌备用。 我用的菌株是：枯草芽孢杆菌株 |
3楼2012-10-21 16:11:41
【答案】应助回帖
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| 你可以看看这篇文献Bacterial Protoplast Fusion: Recombination in Fused Protoplasts of Streptomyces coelicolor，里面有P溶液的配方，链接是http://good.gd/2264083.htm |
2楼2012-10-21 15:22:18
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