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混合配搭

新虫 (小有名气)

[交流] 原生质体相关的

最近在做丝状真菌原生质体,制备时能观察到原生质体,可是再生时就没有菌落长出。再生时渗透压缓冲液还是用的MgS04•7H20,看有的文献悬浮时用的STC等渗液,在文献里看到配方为 STC:1.0 M山梨醇(Sorbitol)、10mM Tris-HCl(pH 7.5))、50 mM CaCl2,充分溶解后,定容至200 ml,121℃灭菌30 min后使用。想问一下,溶STC的溶剂是灭菌水,还是磷酸缓冲液啊?
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lomis

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
都是缓冲液的,因为需要保证pH.
没有命运,只有选择!
2楼2015-04-14 09:44:06
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混合配搭

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lomis at 2015-04-14 09:44:06
都是缓冲液的,因为需要保证pH.

是用磷酸缓冲液配的STC等渗液呗?那磷酸缓冲液和这个STC等渗液,可以121度灭菌吗?还是都要用微孔滤膜过滤除菌啊

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-04-14 13:41:26
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lomis

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
混合配搭: 金币+1 2015-04-15 08:16:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by 混合配搭 at 2015-04-14 13:41:26
是用磷酸缓冲液配的STC等渗液呗?那磷酸缓冲液和这个STC等渗液,可以121度灭菌吗?还是都要用微孔滤膜过滤除菌啊
...

都可以,我们常用的是115℃灭菌。
没有命运,只有选择!
4楼2015-04-14 14:01:43
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混合配搭

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lomis at 2015-04-14 14:01:43
都可以,我们常用的是115℃灭菌。...

STC就是制备出原生质体后,悬浮和稀释时用,为了再生时准备,之前就用MgSO4就可以是吗

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-04-14 14:05:50
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混合配搭

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lomis at 2015-04-14 14:01:43
都可以,我们常用的是115℃灭菌。...

还有最后离心,去上清时,你的沉淀明显吗?我的怎么看不到明显沉淀啊?

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2015-04-14 14:20:52
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BOMN

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想请问配制STC也需要用缓冲液吗

发自小木虫Android客户端
7楼2018-12-12 23:35:34
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