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qizongxian金虫 (小有名气)
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关于原生质体制备的问题
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各位虫友，霉菌制备原生质体是加酶液，我配制了蜗牛酶的酶液，纤维素酶的酶液，还有溶壁酶，可是加进去之后效果不好只能够达到10^4的数量级，这个级数做原生质体融合不够啊~我想请问一下 我的问题出在哪里？ 补充：酶液配制有一个星期了，保存是在四度冰箱里，酶解时间是四个小时，酶解温度是30℃~ 还有，请问你们是怎么制备原生质体的？我怎么都做不出来~~听烦躁的！~ |
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yc652090251
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zhang8826857: 金币+2, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:37:32
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zhang8826857: 金币+2, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:37:32
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我前段时间也在做原生质体的制备，再生后跟你的差不多，后来我又看了几篇文献，发现每种菌的制备条件都不是一样的，这个条件得自己多多摸索，不知道你的条件是摸索过的还是怎么确定的，我打算过几天根据文献修改一下制备条件，比如培养基中甘氨酸的浓度，蔗糖含量，酶浓度及酶解时间等，最后挑选出再生后最好的条件。 这是我的个人想法，我们可以互相交流一下！ |
2楼2012-05-11 21:27:38
qizongxian
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| 培养时可在培养基中加入0.5%-1%的甘氨酸，抑制细胞壁的形成，溶菌酶溶菌快。 |
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