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qizongxian

金虫 (小有名气)

[求助] 关于原生质体制备的问题

各位虫友,霉菌制备原生质体是加酶液,我配制了蜗牛酶的酶液,纤维素酶的酶液,还有溶壁酶,可是加进去之后效果不好只能够达到10^4的数量级,这个级数做原生质体融合不够啊~我想请问一下 我的问题出在哪里?
补充:酶液配制有一个星期了,保存是在四度冰箱里,酶解时间是四个小时,酶解温度是30℃~
还有,请问你们是怎么制备原生质体的?我怎么都做不出来~~听烦躁的!~
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liufuliang

新虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qizongxian: 金币+1, 有帮助, 感谢参与 2012-05-12 21:56:44
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-13 09:40:01
注意以下几点
1、菌不能长的太老
2、蜗牛酶不错
3、放在摇床上消解
4、过滤菌丝
5、加缓冲液离心浓缩
慢慢来!
7楼2012-05-12 21:14:55
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