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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 链霉菌原生质体法转化容易吗？
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 链霉菌原生质体法转化容易吗？

RT，大家做过的可以交流下....
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1楼 2011-12-03 19:02:58
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小小亚杰

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
克隆大虾(金币+1):谢谢参与
zhang8826857(金币+3): 鼓励新虫 2011-12-04 18:14:57
链霉菌还好吧，没做过霉菌的。
做的时候记得做好阴性对照
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2楼2011-12-03 21:37:48
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fxgowen

金虫 (小有名气)
★
克隆大虾(金币+1):谢谢参与
霉菌的原生质体转化有多种方法：萌芽孢子电机法，原生质提电击orPEG法。不过都不太好做吧
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3楼2011-12-03 23:05:28
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-03 16:05:28:
霉菌的原生质体转化有多种方法：萌芽孢子电机法，原生质提电击orPEG法。不过都不太好做吧

谢谢顶贴，呵呵。此贴讨论链霉菌原生质体转化法，也就是你说的PEG介导的化学转化法。真菌的原生质体转化我做了6年，还算小有经验了。
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4楼2011-12-04 12:43:05
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zhen_fang

银虫 (正式写手)
★
克隆大虾(金币+1):谢谢参与
点击电机
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5楼2011-12-04 13:31:13
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williamskia

金虫 (正式写手)
★
克隆大虾(金币+1):谢谢参与
克隆大虾(金币+5): 多些交流啊.. 2011-12-05 19:21:05
克隆大虾(金币+1): 很有帮助... 2012-02-26 18:22:04
PEG介导的化学转化法做链霉菌的我做过，注意不要污染就行了。转化完第二天涂抗性的时候要用力轻柔，最好不要用涂棒用力刮，轻轻带着抗生素溶液（算好终浓度，稀释一下，一般一个10厘米dish用400ul够了），然后就等挑克隆吧。
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6楼2011-12-05 15:17:27
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