| 查看: 4403 | 回复: 24 | |||
qizongxian金虫 (小有名气)
|
[求助]
关于原生质体制备的问题
|
|
各位虫友，霉菌制备原生质体是加酶液，我配制了蜗牛酶的酶液，纤维素酶的酶液，还有溶壁酶，可是加进去之后效果不好只能够达到10^4的数量级，这个级数做原生质体融合不够啊~我想请问一下 我的问题出在哪里？ 补充：酶液配制有一个星期了，保存是在四度冰箱里，酶解时间是四个小时，酶解温度是30℃~ 还有，请问你们是怎么制备原生质体的？我怎么都做不出来~~听烦躁的！~ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 原生质体融合问题求助！
已经有6人回复
- 纳米纤维素制备透明纤维素薄膜
已经有13人回复
- PEG介导原生质体遗传转化的问题，求高手解答！！
已经有8人回复
- 关于黑曲霉培养及制备原生质体的疑问
已经有8人回复
- 关于显微镜下观察到的菌体形态的问题
已经有9人回复
- 真菌菌丝离心问题
已经有11人回复
- 赤霉菌原生质体制备，制不出来，求大神帮助~~~急~~~
已经有10人回复
- 关于原生质体细胞壁的检测问题
已经有5人回复
- 真菌孢子计数问题
已经有6人回复
- 紧急求助--关于霉菌接种、菌悬液制备相关问题
已经有11人回复
- 霉菌原生质体制备中纤维素酶的溶解问题
已经有9人回复
- 用水热法制备TiO2 纳米管，SEM中能看到管状or棒状物质存在，但TEM却找不到这样的结构
已经有23人回复
- 大家来看看这个烟草原生质体里面的细胞器是什么
已经有11人回复
- 链霉菌原生质体法转化容易吗？
已经有5人回复
- 拟南芥转化问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】原生质体培养
已经有15人回复
- 【专题】原生质体的制备、融合与再生
已经有3人回复
yc652090251
金虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 2813.2
- 散金: 4
- 红花: 1
- 帖子: 195
- 在线: 118.1小时
- 虫号: 1408852
- 注册: 2011-09-20
- 专业: 微生物资源与分类学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qizongxian: 金币+2, ★有帮助, 感谢你回帖！~ 2012-05-12 00:16:38
zhang8826857: 金币+2, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:37:32
感谢参与，应助指数 +1
qizongxian: 金币+2, ★有帮助, 感谢你回帖！~ 2012-05-12 00:16:38
zhang8826857: 金币+2, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:37:32
|
我前段时间也在做原生质体的制备，再生后跟你的差不多，后来我又看了几篇文献，发现每种菌的制备条件都不是一样的，这个条件得自己多多摸索，不知道你的条件是摸索过的还是怎么确定的，我打算过几天根据文献修改一下制备条件，比如培养基中甘氨酸的浓度，蔗糖含量，酶浓度及酶解时间等，最后挑选出再生后最好的条件。 这是我的个人想法，我们可以互相交流一下！ |
2楼2012-05-11 21:27:38
qizongxian
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1011.9
- 红花: 1
- 帖子: 127
- 在线: 50小时
- 虫号: 1191754
- 注册: 2011-01-18
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
3楼2012-05-12 00:16:04
yc652090251
金虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 2813.2
- 散金: 4
- 红花: 1
- 帖子: 195
- 在线: 118.1小时
- 虫号: 1408852
- 注册: 2011-09-20
- 专业: 微生物资源与分类学
4楼2012-05-12 12:34:07
yc652090251
金虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 2813.2
- 散金: 4
- 红花: 1
- 帖子: 195
- 在线: 118.1小时
- 虫号: 1408852
- 注册: 2011-09-20
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2012-05-12 12:34:15
AnaSequence
金虫 (小有名气)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 593.3
- 散金: 4
- 帖子: 120
- 在线: 58.5小时
- 虫号: 1549759
- 注册: 2011-12-24
- 专业: 生物信息学
6楼2012-05-12 20:10:44
liufuliang
新虫 (知名作家)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 61.9
- 散金: 1273
- 红花: 4
- 沙发: 1
- 帖子: 7909
- 在线: 274.7小时
- 虫号: 98678
- 注册: 2005-11-10
- 性别: GG
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
7楼2012-05-12 21:14:55
kingsoo
木虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 2619.2
- 帖子: 236
- 在线: 60.7小时
- 虫号: 1382206
- 注册: 2011-08-28
- 性别: MM
- 专业: 肿瘤遗传
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-13 09:40:11
qizongxian: 金币+2, ★有帮助, 谢谢提供宝贵意见 2012-05-13 13:32:44
qizongxian: 金币+5, ★★★很有帮助, 给我提供了别的不同的思路，比较给力！ 2012-05-17 16:05:37
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-13 09:40:11
qizongxian: 金币+2, ★有帮助, 谢谢提供宝贵意见 2012-05-13 13:32:44
qizongxian: 金币+5, ★★★很有帮助, 给我提供了别的不同的思路，比较给力！ 2012-05-17 16:05:37
| 培养时可在培养基中加入0.5%-1%的甘氨酸，抑制细胞壁的形成，溶菌酶溶菌快。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
chibang12208楼2012-05-13 09:06:17
9楼2012-05-14 14:25:19
qizongxian
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1011.9
- 红花: 1
- 帖子: 127
- 在线: 50小时
- 虫号: 1191754
- 注册: 2011-01-18
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
10楼2012-05-14 21:27:48
10