| 查看: 1099 | 回复: 0 | |||
Insecta_A铜虫 (小有名气)
|
[交流]
关于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的问题
|
|
我做的是6%变性PAGE电泳（尿素变性），75V 1.5h，银染显色固定后照相检测SSR引物多态性。在这过程中出现了一下几个问题，想请教各位： 1.Marker（DL500 DNA Marker）出现不准确现象，我的DNA PCR样品经过95°变性5min处理成单链后再上样，请问我的Marker需要什么特殊处理吗？或者有什么更合适变性PAGE使用的DNA Marker？ 2.染色固定后拿去伯乐的凝胶成像仪上照相，结果怎么都照不出来，请问大家照相是怎么搞的（这个感觉应该是很简单的事情吧，结果我遇到了，汗）？ 3.我做的是小板子（因为没有大板子）的胶，结果如下图，我的目的条带大约在150-210bp，我们姑且认为Marker是准的，感觉上在那附近的条带应该有4条，但是没有跑开，请问大家能不能帮忙优化条件，比如电泳的电压、时间等，或者其他什么原因？ 4.还有就是跑出来的条带为啥感觉有点拖带（上样量为 PCR产物1.5ul， loading buffer 1.5ul），请问如何解决这些问题？ 5.最后，请大家根据这张图提一些可以改进的地方（我也是第一次做PAGE，很多都不懂，希望大家能帮忙） 没有多少金币了，全散了请教  M63.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有130人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
PCR-SSCP非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中的交联度指的是什么？怎么计算？
已经有4人回复
- 短RNA的变性聚丙烯酰胺电泳
已经有7人回复
- SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳成像结果的若干问题
已经有6人回复
- 蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳没有条带
已经有7人回复
- 新手聚丙烯酰胺凝胶电泳，条带弯曲严重，求指教，谢谢！
已经有23人回复
- 为什么我的DNA 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 跑成这个鬼样？
已经有12人回复
- 关于丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA样品的几个问题
已经有9人回复
- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（ISSR）
已经有44人回复
- 【求助】蛋白质非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
已经有16人回复
- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电压方面的问题
已经有20人回复
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA
已经有8人回复
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶不聚合
已经有7人回复
- 做SRAP标记的进来，DNA聚丙烯酰胺电泳，预电泳问题。。。
已经有22人回复
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，染色问题
已经有8人回复
- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳制板的问题
已经有24人回复
- 【求助】变性聚丙烯酰胺电泳的marker怎么处理
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的问题
已经有14人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
20