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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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逸悠然

铜虫 (小有名气)

[求助] 分离胶跑的时间太长 已有1人参与

本人新手一枚,最近在做western,配了5%浓缩胶和15%分离胶,结果1、浓缩胶80V跑了半小时,而分离胶110V跑了两个半小时,这样是不是对实验结果有影响呀!!
2、buffer跑到底后,结果根据marker,我想要的15K的蛋白还没跑开,这是为什么呢?
求高手指导,感激不尽!!
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逸悠然

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-04-08 19:47:24
跑胶时间上问题不是很大,关键是你说你没有跑开15kd的条带,这个很诡异!我10kd的用和你差不多的条件,分的很清楚,你确定自己marker没有认错吗?如果都OK就把自己配胶的试剂再检查一下,是不是有失效的,一般都分得 ...

跑分离胶时间长没有问题吗?我一直以为是这个原因呢,别人貌似都跑一个小时,但我跑了两个半。还有就是PH值的影响大吗?比如说6.8、8.8配的稍微有点误差,影响大吗?我也不知道怎么回事,一开始用的别人配的,都跑出来了,结果自己配的话,就成这样,10K的那条黄色带从来没出来过!
3楼2015-04-08 21:29:25
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑胶时间上问题不是很大,关键是你说你没有跑开15kd的条带,这个很诡异!我10kd的用和你差不多的条件,分的很清楚,你确定自己marker没有认错吗?如果都OK就把自己配胶的试剂再检查一下,是不是有失效的,一般都分得开的
2楼2015-04-08 19:47:24
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 逸悠然 at 2015-04-08 21:29:25
跑分离胶时间长没有问题吗?我一直以为是这个原因呢,别人貌似都跑一个小时,但我跑了两个半。还有就是PH值的影响大吗?比如说6.8、8.8配的稍微有点误差,影响大吗?我也不知道怎么回事,一开始用的别人配的,都跑 ...

影响当然大,那就是你试剂问题了,重新配胶吧
4楼2015-04-08 21:32:48
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逸悠然

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-04-08 21:32:48
影响当然大,那就是你试剂问题了,重新配胶吧...

我昨天又重新检测一下,PH值问题不大,但是还是那样,分离胶最后没跑开,还是跑了两个半小时,能知道具体哪里出错了吗
5楼2015-04-10 09:11:40
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