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宋伟同学

铜虫 (著名写手)

[求助] 为什么我在NCBI上搜EGFP的基因序列搜不到呢,这东西应该有啊。 已有3人参与

搜enhanced green fluorescent protein 也没有。为什么呢,这个应该烂大街了啊,只有GFP,能通用吗,设计引物方面。
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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宋伟同学: 金币+3, 有帮助, 谢谢,我求的是EGFP序列,GFP我也有,不过还是谢谢。 2015-04-09 14:50:08
我这有GFP的序列

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
2楼2015-04-08 13:17:18
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zhangli_2011

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
宋伟同学: 金币+5, 有帮助, 谢谢。能分享一下吗。 2015-04-09 14:49:14
我有EGFP的序列,测序出来的
3楼2015-04-08 13:17:42
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zhangli_2011

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
宋伟同学: 金币+10, 有帮助, 谢啦,能不能吧eGFP-F也给我啊。谢谢。 2015-04-09 14:48:03
eGFP-R:CGTCGCCGTCCAGCTCGACCAG
4楼2015-04-08 13:20:29
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sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xy656691: 金币+5, 应助指数+1, 非常感谢 2015-04-09 14:26:31
宋伟同学: 金币+5, 有帮助 2015-04-09 14:48:51
EGFP的序列(从pEGAD的质粒上来的),没带终止密码子,需要的话自己设计引物的时候加上去:ATGGTGAGCAAGGGCGAGGAGCTGTTCACCGGGGTGGTGCCCATCCTGGTCGAGCTGGACGGCGACGTAAACGGCCACAAGTTCAGCGTGTCCGGCGAGGGCGAGGGCGATGCCACCTACGGCAAGCTGACCCTGAAGTTCATCTGCACCACCGGCAAGCTGCCCGTGCCCTGGCCCACCCTCGTGACCACCCTGACCTACGGCGTGCAGTGCTTCAGCCGCTACCCCGACCACATGAAGCAGCACGACTTCTTCAAGTCCGCCATGCCCGAAGGCTACGTCCAGGAGCGCACCATCTTCTTCAAGGACGACGGCAACTACAAGACCCGCGCCGAGGTGAAGTTCGAGGGCGACACCCTGGTGAACCGCATCGAGCTGAAGGGCATCGACTTCAAGGAGGACGGCAACATCCTGGGGCACAAGCTGGAGTACAACTACAACAGCCACAACGTCTATATCATGGCCGACAAGCAGAAGAACGGCATCAAGGTGAACTTCAAGATCCGCCACAACATCGAGGACGGCAGCGTGCAGCTCGCCGACCACTACCAGCAGAACACCCCCATCGGCGACGGCCCCGTGCTGCTGCCCGACAACCACTACCTGAGCACCCAGTCCGCCCTGAGCAAAGACCCCAACGAGAAGCGCGATCACATGGTCCTGCTGGAGTTCGTGACCGCCGCCGGGATCACTCTCGGCATGGACGAGCTGTACAAG
5楼2015-04-09 06:00:02
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宋伟同学

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sun_in_night at 2015-04-09 06:00:02
EGFP的序列(从pEGAD的质粒上来的),没带终止密码子,需要的话自己设计引物的时候加上去:ATGGTGAGCAAGGGCGAGGAGCTGTTCACCGGGGTGGTGCCCATCCTGGTCGAGCTGGACGGCGACGTAAACGGCCACAAGTTCAGCGTGTCCGGCGAGGGCGAGGGCGATGCC ...

额,谢谢,但是设计引物一定要加终止密码子吗,不加会不会有问题。
6楼2015-04-09 14:48:42
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sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
宋伟同学: 金币+27, ★★★★★最佳答案 2015-04-20 21:11:39
引用回帖:
6楼: Originally posted by 宋伟同学 at 2015-04-08 18:48:42
额,谢谢,但是设计引物一定要加终止密码子吗,不加会不会有问题。...

加不加终止子要看你要把GFP放在哪了了。如果把GFP放在你的蛋白前面,那就不用了,也就是N端结合‘,但是在你的蛋白的最后要加终止子。如果把GFP放在你的蛋白后面,那就在GFP的后面加终止子,你的蛋白那里就不用了。

总之,哪个在后面,那么哪个就需要终止子来终止翻译。
7楼2015-04-10 05:39:28
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妙儿2008

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sun_in_night at 2015-04-09 06:00:02
EGFP的序列(从pEGAD的质粒上来的),没带终止密码子,需要的话自己设计引物的时候加上去:ATGGTGAGCAAGGGCGAGGAGCTGTTCACCGGGGTGGTGCCCATCCTGGTCGAGCTGGACGGCGACGTAAACGGCCACAAGTTCAGCGTGTCCGGCGAGGGCGAGGGCGATGCC ...

您好!请问您用过PEGAD的质粒吗?我最近用这个质粒提不出来,提取出来条带很弱,能请教一下吗?
8楼2016-03-10 11:24:25
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