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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 关于蛋白质复性的问题，急急急
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hj2013china

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白质复性的问题，急急急已有1人参与

我的蛋白的等电点是8.8，包涵体透析袋透析如何选择PH值？透析液考虑哪些问题？如何选择正确的透析液？透析稀释多少倍?
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1楼2015-03-17 15:11:43
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lomis

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hj2013china: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-03-18 09:27:54
尽量选择远离等电点，一般在中性吧。
透析一般是梯度透析，逐步降低变性剂的浓度，你可摸索一下。
复性不同的蛋白注意事项不同，通用的就是低温透析，梯度降低变性剂浓度。
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没有命运，只有选择！
2楼2015-03-17 15:33:35
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hj2013china

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lomis at 2015-03-17 15:33:35
尽量选择远离等电点，一般在中性吧。
透析一般是梯度透析，逐步降低变性剂的浓度，你可摸索一下。
复性不同的蛋白注意事项不同，通用的就是低温透析，梯度降低变性剂浓度。

一般加GSH/GSSH多少的量啊？
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3楼2015-03-17 16:08:46
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lomis

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hj2013china at 2015-03-17 16:08:46
一般加GSH/GSSH多少的量啊？...

通常使用1～3mM还原型巯基试剂，还原型和氧化型巯基试剂的比例通常为10：1～1：5。
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没有命运，只有选择！
4楼2015-03-17 16:32:59
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elise1987

金虫 (著名写手)
透析袋分子量小于目标分子的一半即可，尿素等都很小。一般8-10KD左右即可。
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不折腾，不胡闹，珍惜时间和生命
5楼2015-04-03 11:46:09
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