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hj2013china

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白质复性的问题,急急急 已有1人参与

我的蛋白的等电点是8.8,包涵体透析袋透析如何选择PH值?透析液考虑哪些问题?如何选择正确的透析液?透析稀释多少倍?
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lomis

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
hj2013china: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-03-18 09:27:54
尽量选择远离等电点,一般在中性吧。
透析一般是梯度透析,逐步降低变性剂的浓度,你可摸索一下。
复性不同的蛋白注意事项不同,通用的就是低温透析,梯度降低变性剂浓度。
没有命运,只有选择!
2楼2015-03-17 15:33:35
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hj2013china

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lomis at 2015-03-17 15:33:35
尽量选择远离等电点,一般在中性吧。
透析一般是梯度透析,逐步降低变性剂的浓度,你可摸索一下。
复性不同的蛋白注意事项不同,通用的就是低温透析,梯度降低变性剂浓度。

一般加GSH/GSSH多少的量啊?
3楼2015-03-17 16:08:46
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lomis

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hj2013china at 2015-03-17 16:08:46
一般加GSH/GSSH多少的量啊?...

通常使用1~3mM还原型巯基试剂,还原型和氧化型巯基试剂的比例通常为10:1~1:5。
没有命运,只有选择!
4楼2015-03-17 16:32:59
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elise1987

金虫 (著名写手)

透析袋分子量小于目标分子的一半即可,尿素等都很小。一般8-10KD左右即可。
不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
5楼2015-04-03 11:46:09
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