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关于蛋白质复性的问题,急急急
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hj2013china
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关于蛋白质复性的问题,急急急
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我的蛋白的等电点是8.8,包涵体透析袋透析如何选择PH值?透析液考虑哪些问题?如何选择正确的透析液?透析稀释多少倍?
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关于蛋白复性问题,急急急
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1楼
2015-03-17 15:11:43
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lomis
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
hj2013china: 金币+50,
★★★
很有帮助
2015-03-18 09:27:54
尽量选择远离等电点,一般在中性吧。
透析一般是梯度透析,逐步降低变性剂的浓度,你可摸索一下。
复性不同的蛋白注意事项不同,通用的就是低温透析,梯度降低变性剂浓度。
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没有命运,只有选择!
2楼
2015-03-17 15:33:35
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hj2013china
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2楼
:
Originally posted by
lomis
at 2015-03-17 15:33:35
尽量选择远离等电点,一般在中性吧。
透析一般是梯度透析,逐步降低变性剂的浓度,你可摸索一下。
复性不同的蛋白注意事项不同,通用的就是低温透析,梯度降低变性剂浓度。
一般加GSH/GSSH多少的量啊?
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3楼
2015-03-17 16:08:46
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3楼
:
Originally posted by
hj2013china
at 2015-03-17 16:08:46
一般加GSH/GSSH多少的量啊?...
通常使用1~3mM还原型巯基试剂,还原型和氧化型巯基试剂的比例通常为10:1~1:5。
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没有命运,只有选择!
4楼
2015-03-17 16:32:59
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elise1987
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专业: 免疫生物学
透析袋分子量小于目标分子的一半即可,尿素等都很小。一般8-10KD左右即可。
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不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
5楼
2015-04-03 11:46:09
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