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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lindashang

铜虫 (小有名气)

[求助] 生物新手帮忙分析一下这个western blot图 已有2人参与

我是一个实验新手，可以帮忙详细分析一下这张图嘛，不太明白这个图表达了什么意思，谢谢各位大神

生物新手帮忙分析一下这个western blot图
搜狗截图20150129205531.png
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百尺竿头，更进一步
1楼 2015-01-29 21:01:07
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在Hela细胞中，分别转染空载体和带flag标签的FAM122A蛋白，同时用Etoposide刺激不同时间，细胞裂解提取蛋白进行western检测，检测指标包括右侧所示的6种蛋白：
第一行为FAM122A，证明外转质粒过表达成功，而转染空载体的样品中则没有，同时表明FAM122A的表达随着刺激时间的增加而增强
第二行蛋白H2AX在过表达FAM122A后，随着刺激时间的增加表达增强
第三行蛋白tubulin在过表达FAM122A后，随着刺激时间的增加表达减少
第四行蛋白ATM趋势不变，但总体表达减弱
第五行蛋白BRCA1在过表达FAM122A后，随着刺激时间的增加表达增强
第六行蛋白CHK2在转染空载体的对照组中，表达逐渐增强，在过表达FAM122A后，随着刺激时间的增加先增强后减弱
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医学&统计学
2楼2015-01-29 23:27:43
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maila
3楼2015-01-30 07:37:22
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lindashang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-01-29 23:27:43
在Hela细胞中，分别转染空载体和带flag标签的FAM122A蛋白，同时用Etoposide刺激不同时间，细胞裂解提取蛋白进行western检测，检测指标包括右侧所示的6种蛋白：
第一行为FAM122A，证明外转质粒过表达成功，而转染空 ...

董博士你分析的好详细，请问一下那张图总的证明了什么呢？
                              这些蛋白与FAM122A和Etoposide什么关系？
                              Etoposide是一种抗癌药物，蛋白表达是因为药物使蛋白断裂磷酸化，蛋白磷酸化表达才会增强吗？
                               不好意思我是学化学的看不懂。
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百尺竿头，更进一步
4楼2015-01-30 14:20:41
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lindashang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-01-29 23:27:43
在Hela细胞中，分别转染空载体和带flag标签的FAM122A蛋白，同时用Etoposide刺激不同时间，细胞裂解提取蛋白进行western检测，检测指标包括右侧所示的6种蛋白：
第一行为FAM122A，证明外转质粒过表达成功，而转染空 ...

tubulin不是内参吗？表达也会根据药物表达增强？
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百尺竿头，更进一步
5楼2015-01-30 14:22:37
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ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
发文献上来，参考文献才好分析

[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼2015-01-31 06:17:18
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lindashang

铜虫 (小有名气)
顶上去！！！
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百尺竿头，更进一步
7楼2015-02-02 14:45:56
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heady_z

金虫 (小有名气)
etoposide 是DNA拓扑异构酶的抑制剂，简单说这个药物处理细胞可以使细胞DNA发生断裂，γ-H2AX是DNA双链断裂的内参，H2AX是组蛋白的一种，在DNA发生双链断裂的时候其139位丝氨酸会发生磷酸化聚集在断裂的DNA末端，称为γ-H2AX。ATM是也是受DNA损伤而被激活的一类蛋白激酶，能够磷酸化下游多个底物，包括H2AX。
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8楼2015-02-03 14:16:08
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