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ruanxu

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR出现3个重复的引物序列 已有3人参与

这是引物CAC ACG GAA TAT ACC TCT CTG CGA TCC,出现了3个重复的。而只有3个碱基不同的引物CAC ACG GAA TAT TAC TCT CTG CGA TCC
就没有不正常,没有出现重复的。
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caihang

铜虫 (小有名气)

原谅我不懂你在说什么。
2楼2015-01-20 17:04:05
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ruanxu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by caihang at 2015-01-20 17:04:05
原谅我不懂你在说什么。

这是引物CAC ACG GAA TAT ACC TCT CTG CGA TCC,PCR后出现了3个重复的引物序列。而只有3个碱基不同的引物CAC ACG GAA TAT TAC TCT CTG CGA TCC
就没有不正常,没有出现重复的引物序列。
3楼2015-01-20 17:28:06
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:09:53
还是不懂???????
4楼2015-01-20 20:01:17
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ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:10:00
不知道楼主在说些什么,表达太差?还是我们理解力太差!????

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-01-20 21:03:26
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:10:07
能否再表达的清楚一点,把你的产物整个序列放上来可否?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2015-01-20 23:03:37
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vaccine_jw

新虫 (初入文坛)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:10:14
应该说的是pcr产物测序后的事情吧

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-01-20 23:23:13
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huangchj03

金虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:10:22
楼主的问题是什么?我也没有理解3个重复是什么意思,难道是非特异?难道要问为什么会出现非特异扩增?
8楼2015-01-21 12:22:26
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

帮顶一下,我设计的引物在进行PCR的时候,PCR产物中也出现了引物的多个重复序列,大家给个建议哈。
9楼2015-03-25 17:06:48
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

我来回复一下楼主,最近我们也遇到类似情况,最近刚刚得到解决。序列中出现引物序列多个重复的原因应该是PCR退火温度过低造成了错配,因此只要提高退火温度就能解决这个问题。
10楼2015-04-24 22:59:16
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