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pycraze

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质电泳条带问题,急!!! 已有2人参与

各位虫友,我想咨询个问题,我是做蛋白分离与纯化的,粗蛋白过层析柱后,收集有效峰,然后装入透析袋(截留分子量8-14KDa),拿聚乙二醇20000包埋浓缩,之后装入离心管冷冻干燥,始终干燥不彻底,离心管底部有残余液体,后来发现是聚乙二醇溶液,可能是聚乙二醇渗入透析袋所致,然后离心去掉聚乙二醇溶液,跑电泳,发现条带不正常(图从左至右为marker,样品1,样品2),上粗下细,如图,请问这是情况是不是由聚乙二醇引起的???后来我拿蔗糖浓缩蛋白,发现蔗糖也会渗入透析袋,后来用蒸馏水透析时,透析袋里体积溶液又变大,浓缩效果不好,,请问还其他什么浓缩蛋白的好方法,求推荐!!!

蛋白质电泳条带问题,急!!!
电泳图谱2.jpg
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
平时用PEG浓缩后在20mM PB里透析没见体积会增大!把透析袋扎紧一点看有效果不。
2楼2015-01-14 18:41:56
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haze12344

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉像是有一些大分子把泳道都挤变形了,但是我以前用聚乙二醇浓缩也没试过会渗入的。是不是透析袋有问题?
生物你好
3楼2015-04-09 09:38:02
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