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黄太帝

新虫 (正式写手)

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[交流] 提取土壤总DNA跑胶没条带求助已有8人参与

最近在提取土壤DNA，提取些出来的DNA直接跑水平胶有条带，不过较暗
提取些出来的DNA经过PCR后却没有条带了，这是怎么回事，怎么改进呢？求赐教。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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做只快乐的小虫快乐得学习

1楼 2015-01-12 19:39:32

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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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西门吹雪170: 2015-01-13 22:26:56
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-13 22:27:37

您好啊，水平胶有条带，但是暗，以为PCR之后能够得到较多的量，但是PCR之后却啥都没有，所以问题肯定出在你PCR的过程中啊。
PCR过程中出现问题，得不到条带，可以考虑一下几个方面：
①引物设计是否合理
②PCR时的反应体系，尤其是酶，普通Taq酶有错配（但不至于一点也扩不出来，可以换成热启动Taq酶热启动Taq酶
③ 扩增前模板是否已经降解

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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

4楼2015-01-13 09:42:48