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苗静

金虫 (正式写手)

[求助] 高效液相色谱分析峰消失了 已有1人参与

求助高手,最近在做中药有效成分HPLC含量测定,同样一个样品测第一次时只出了2个峰,测第二次时多出了好几个峰,后面换了根柱子,此类现象又出现了好几次,请问是什么原因啊?能否避免?
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cpuclz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 苗静 at 2015-01-02 20:07:51
柱压是正常的,用的是药典上的方法乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱测甘草中甘草苷和甘草酸铵的含量,甘草苷出峰以后后面的峰就都不见了,再进一针后面的峰面积都加倍了。按照药典方法测的峰分离度比较好,不知道为什 ...

对照品进样是什么情况?正常吗?
可以试试,进一针供试液,再进一针空白。如果空白有峰的话,证明是前一针的残留。
方法验证能通过的话,可以不用理会那些杂质。
还有,确认供试液是稳定的。别放久了会变坏。
4楼2015-01-02 22:21:27
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主给是信息太少了……
先看柱压是不是正常,排除仪器的问题。
再看方法是不是合适。什么样的方法做的,等度还是梯度。
有可能是样品里杂质多,第一针没有全部出来,在第二针的时候出来了
2楼2015-01-02 18:15:29
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苗静

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2015-01-02 18:15:29
楼主给是信息太少了……
先看柱压是不是正常,排除仪器的问题。
再看方法是不是合适。什么样的方法做的,等度还是梯度。
有可能是样品里杂质多,第一针没有全部出来,在第二针的时候出来了

柱压是正常的,用的是药典上的方法乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱测甘草中甘草苷和甘草酸铵的含量,甘草苷出峰以后后面的峰就都不见了,再进一针后面的峰面积都加倍了。按照药典方法测的峰分离度比较好,不知道为什么会出现这种现象?
3楼2015-01-02 20:07:51
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沸沸27

新虫 (小有名气)

时间久了 有反应发生吗
5楼2015-01-04 11:49:02
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