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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 高效液相色谱分析峰消失了
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苗静

金虫 (正式写手)

[求助] 高效液相色谱分析峰消失了 已有1人参与

求助高手，最近在做中药有效成分HPLC含量测定，同样一个样品测第一次时只出了2个峰，测第二次时多出了好几个峰，后面换了根柱子，此类现象又出现了好几次，请问是什么原因啊？能否避免？
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1楼 2015-01-02 17:06:15
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主给是信息太少了……
先看柱压是不是正常，排除仪器的问题。
再看方法是不是合适。什么样的方法做的，等度还是梯度。
有可能是样品里杂质多，第一针没有全部出来，在第二针的时候出来了
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2楼2015-01-02 18:15:29
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苗静

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2015-01-02 18:15:29
楼主给是信息太少了……
先看柱压是不是正常，排除仪器的问题。
再看方法是不是合适。什么样的方法做的，等度还是梯度。
有可能是样品里杂质多，第一针没有全部出来，在第二针的时候出来了

柱压是正常的，用的是药典上的方法乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱测甘草中甘草苷和甘草酸铵的含量，甘草苷出峰以后后面的峰就都不见了，再进一针后面的峰面积都加倍了。按照药典方法测的峰分离度比较好，不知道为什么会出现这种现象？
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3楼2015-01-02 20:07:51
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cpuclz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 苗静 at 2015-01-02 20:07:51
柱压是正常的，用的是药典上的方法乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱测甘草中甘草苷和甘草酸铵的含量，甘草苷出峰以后后面的峰就都不见了，再进一针后面的峰面积都加倍了。按照药典方法测的峰分离度比较好，不知道为什 ...

对照品进样是什么情况？正常吗？
可以试试，进一针供试液，再进一针空白。如果空白有峰的话，证明是前一针的残留。
方法验证能通过的话，可以不用理会那些杂质。
还有，确认供试液是稳定的。别放久了会变坏。
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4楼2015-01-02 22:21:27
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沸沸27

新虫 (小有名气)
时间久了 有反应发生吗
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5楼2015-01-04 11:49:02
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