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qingfeng2011金虫 (正式写手)
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[求助]
酵母双杂求助-质粒在酵母中的表达(Gal4系统) 已有4人参与
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亲爱的各位虫友,本人最近在做酵母双杂验证两个蛋白的互作,是将2个质粒依次转到AH109 中的,所用载体为pGBKT7 和pGADT7。在缺色氨酸和亮氨酸的SD培养基上能长出单菌落,并且PCR验证两个质粒都已转入。但是四缺板加JA-Ile(只有加入这种物质才可发生互作)后并没有菌落生长。 对于这种原因,自己也进行了以下分析,可能 蛋白并没有表达。但是有一篇Nature就做出来了,只不过我们用的载体的差别在于他们用的是Gateway系统,我们是普通的载体,载体名称都是一样的。非常困惑,请各位虫友帮忙解答!万分感谢! |
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lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
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2楼2014-12-21 08:47:16
3楼2014-12-21 10:24:05
d00614028
银虫 (小有名气)
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- 专业: 生物大分子结构与功能
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