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qingfeng2011金虫 (正式写手)
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[求助]
酵母双杂求助-质粒在酵母中的表达（Gal4系统）已有4人参与
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亲爱的各位虫友，本人最近在做酵母双杂验证两个蛋白的互作，是将2个质粒依次转到AH109 中的，所用载体为pGBKT7 和pGADT7。在缺色氨酸和亮氨酸的SD培养基上能长出单菌落，并且PCR验证两个质粒都已转入。但是四缺板加JA-Ile（只有加入这种物质才可发生互作）后并没有菌落生长。 对于这种原因，自己也进行了以下分析，可能 蛋白并没有表达。但是有一篇Nature就做出来了，只不过我们用的载体的差别在于他们用的是Gateway系统，我们是普通的载体，载体名称都是一样的。非常困惑，请各位虫友帮忙解答！万分感谢！ |
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