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一砖头飘死

银虫 (小有名气)

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[求助] 关于组成型质粒表达的问题？已有1人参与

有如下几个问题：

1.RBS到第一个ATG的距离是23bp，这个有点长，对我的后续GFP基因的翻译影响大吗？

2.我的目的基因GFP的ATG前面也有个ATG，这个ATG影响我的目的基因的后续表达吗？
会不会我表达出来的GFP蛋白多了一个甲硫氨酸，从导致没有吸收峰，检测不到荧光？

关于组成型质粒表达的问题？

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1楼 2014-12-19 12:08:26

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一砖头飘死

银虫 (小有名气)

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高手呢？

2楼2014-12-19 13:23:54

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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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一砖头飘死: 金币+5, ★有帮助 2014-12-19 17:31:50
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-19 18:34:24

一般来说商品化的表达质粒插入到多克隆位点的cDNA表达都不成问题。如果是你自己改造过的质粒，只能表达后才能知道表达效率。
前面的ATG应该会使肽链的N端增加一个甲硫氨酸，GFP荧光对结构改变比较敏感，你可以表达出来看。如果发现对荧光影响很大，你的发现或许可以发篇好文章。

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慎思明辨博学笃行

3楼2014-12-19 16:07:25

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