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yanshumo

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何去除RNA中的盐离子? 已有3人参与

提完RNA后,测紫外,260/280正常,但是225nm左右有一个很大的峰,问了师兄说可能是盐离子,我中间有一步加了5M的NACL。
请问各位大神们,怎样消除盐离子对RNA 的影响呢?
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认真广博创新
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-12-17 19:55:29
乙醇沉淀后用75%乙醇洗下沉淀

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-16 11:51:48
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yanshumo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-12-16 11:51:48
乙醇沉淀后用75%乙醇洗下沉淀

我已经洗了两次了,洗多会不会降解掉呢
认真广博创新
3楼2014-12-16 13:00:16
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-17 19:55:43
引用回帖:
3楼: Originally posted by yanshumo at 2014-12-16 13:00:16
我已经洗了两次了,洗多会不会降解掉呢...

你用灭过的depc水配,不会有问题的

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-12-16 15:02:56
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liyuecoool

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-17 19:55:50
1.一般纯度不够可以用氯仿抽提一次,然后乙醇沉淀再溶解。
2.操作中为什么要加入5M NaCl?可以考虑换方法提取。比如试剂盒。如果要是为了沉淀核酸完全加入的盐,建议加缓冲液性质的醋酸钠,3M,PH5,.2即可。
5楼2014-12-16 16:32:59
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你搜一下siRNA脱盐,试试吧
6楼2014-12-18 13:05:10
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yanshumo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liyuecoool at 2014-12-16 16:32:59
1.一般纯度不够可以用氯仿抽提一次,然后乙醇沉淀再溶解。
2.操作中为什么要加入5M NaCl?可以考虑换方法提取。比如试剂盒。如果要是为了沉淀核酸完全加入的盐,建议加缓冲液性质的醋酸钠,3M,PH5,.2即可。

加NaCl是为了除多糖的,
认真广博创新
7楼2014-12-25 13:04:18
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