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木虫 (小有名气)

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[求助] 质粒构建长短问题

大家好，由于实验中遇到一个关于质粒构建问题现在无法解决特到此求大神们指点迷津哈。
事情是这样的，我想看看一个叫做GJa的基因里面的NF-kB结合位点对该基因表达的影响。于是就按着一篇文献上的方法找到了其中的NF-kB结合位点。但是问题来了，文章中居然做了两个长度的片段。而且貌似也没有说这两个片段长度有何区别。而自己按着该位点进行突变的话可以只整一个300多bp的质粒，实验结果也表明了该位点能够影响Gja的表达。所以我很疑惑为何文章里面做了258和699这两个长度的片段。
下面我就给出了Gja基因的启动子区域，其中大写字母为外显子起始部分（只copy了一小部分哈

）
下划线部分就是包含了NF-kB结合部位的序列

貌似和文献上的也是反的。。。。。。
然后我把文献也放上来了。如果有大神能解决这个问题的话必有重谢哈。（或者文献本身就有问题？）先在此跪谢了

ggtggtggaggaggaggaggagggagggaggggaggg
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附件 1 : AnangiotensinII-andNF-kappaB-dependentmechanismincreasesconnexin43inmurinearteriestargetedbyrenin-dependenthypertension.pdf

2014-12-06 20:21:49, 713.55 K