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ygllong

木虫 (正式写手)

[交流] 请教淀粉酶产生菌筛选问题

在筛选淀粉酶产生菌时,平板中有明显的透明圈,但是做摇瓶发酵时却检测不到酶活,为什么呢?谢谢大家给点意见
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心在路上
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

★ ★
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ygllong: 金币+1, 淀粉是唯一碳源,取样每隔24h测一次都未检测到 2014-12-06 20:48:48
液体培养基中也有淀粉诱导吧?淀粉是唯一碳源吗?取样时期是哪个时期,那时是否有淀粉被降解?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-12-06 15:47:31
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ygllong

木虫 (正式写手)

淀粉是唯一碳源,取样每隔24h测一次都未检测到
心在路上
3楼2014-12-06 20:48:34
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zhaodahe

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有没有测淀粉的浓度变化?再确定取样时间。24小时是不是过长了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-12-06 21:11:34
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陈_劼_翔

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
氮源用的是无机氮源么?菌浓变化有没测?
这是签名~
5楼2014-12-07 09:16:05
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
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ygllong: 金币+1, 有道理 2014-12-07 21:27:04
菌不纯,即有产酶菌,也有不产酶菌,固体培养因为扩散阻力大,菌分离,有降解圈;液体条件下,低酶浓度可生长,因此,酶活测不出
6楼2014-12-07 12:34:51
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)


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透明圈不能说明淀粉酶活力的高低。
7楼2014-12-07 17:42:52
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ygllong

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by virty76 at 2014-12-07 12:34:51
菌不纯,即有产酶菌,也有不产酶菌,固体培养因为扩散阻力大,菌分离,有降解圈;液体条件下,低酶浓度可生长,因此,酶活测不出

有可能菌体维持低酶活即能满足自身就不分泌酶了?还有可能其他的吗?
心在路上
8楼2014-12-07 21:31:32
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
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ygllong: 金币+1, 但是为何在平板中形成较大的水解圈,但是摇瓶酶活检测不到呢?这个比较困惑,谢谢,有水解圈按理应当有淀粉酶的分泌,但是发酵液中测不出酶活 2014-12-08 11:07:20
4.2关于淀粉降解微生物的筛选方法
    在菌种初筛时依据在含淀粉平板上产生降解圈来判断微生物是否产淀粉酶,一般认为H/D值高即产酶活力高,比值小就被淘汰[116]。但本工作发现H/D值值的大小与产酶活力的高低之间并没有明显的相关性,有的H/D值虽然不大,但酶活并不低。所以,淀粉酶产生菌产淀粉酶活力的高低应以多次发酵摇瓶培养测酶活的复筛验证为准。
    推测H/D值的高低可能与以下因素有关[117]:①淀粉平板的厚薄:相对于同一个微生物来说,在培养条件相同的情况下,由于产酶量一定,故平板越厚H/D值越小,平板越薄H/D值越大;②平板的形状:由于培养皿在生产过程中不可能做到完全一致,所以造成很多培养皿的底部不是完全平整的,甚至有较大变形,这样就会造成在同一块淀粉平板上培养基的厚薄不一致,引起系统误差;③各种微生物所产淀粉酶在淀粉平板上的稳定性不一致,产蛋白酶活力的高低也不一致。有的微生物所产淀粉酶比较稳定,就能在平板上存活较久,有利于形成较大的H/D值。有的微生物产蛋白酶活力较低,对淀粉酶的降解作用较弱,这也有利于形成较大的H/D值。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2014-12-07 23:19:05
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

硕士 冼 亮 酸性低温淀粉酶产生菌的筛选、分离和鉴定及其酶学特性的初步研究
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
10楼2014-12-07 23:19:48
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