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海浪016

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于高效液相色谱HPLC 梯度洗脱的问题 已有4人参与

我有个样品是用HPLC梯度洗脱 来进行液相分析,但是配出来的流动相在洗脱过程中的主峰出峰时间总是变化,比如说配了一瓶流动相 出峰时间为35min,再配一瓶流动相打样的时候主峰出峰时间可能就变成了25min或45min。请教一下各位虫友,这可能是什么原因?
说明一下:1、我配制的流动相A为磷酸二氢铵缓冲液,PH用磷酸调节为3.1,该缓冲液过滤后经过超声后使用。梯度洗脱的流动相B为色谱乙腈。
                  2、在整个过程中其他条件都相同,比如所用仪器相同、柱温相同、色谱柱相同,进样量、标准品相同、检测波长相同。
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一瓶水相一瓶有机相,可能会造成混合不均匀甚至盐析出的情况,导致保留时间变化,尝试在A相中预先加一点有机相比如5%乙腈看看,当然,梯度条件也要因此而微调一下
铁甲依然在
9楼2014-11-26 12:15:15
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