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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 超声波破碎细胞
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

[求助] 超声波破碎细胞 已有2人参与

问题很多，还请虫友耐心解答，不要求全能回答，会多少写多少
1、请问一下因素在超声波破碎中分别有哪些影响：调谐、功率、缓冲液（是不是一定要在缓冲液中进行，纯水行吗？缓冲液ph有影响吗？）、工作和间歇时间长度、总时间长度。
2、为什么要有间歇时间？
3、怎么判断菌是否破碎的好？有哪些指标？
4、以我的操作为例，我采用5s工作、3s间歇，总共15min，频率40w的设置破碎，吸取1ml菌液，加入5ml水进行超声处理（菌浓度较高），菌体大小是大肠杆菌的几倍。结果是我镜检发现细胞都很完整，破碎效果很差。问题出在哪了？
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1楼 2014-11-12 21:25:51
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
频率好低~一般这种论文里都有的~ 我一般破菌是工作10~15S，间歇10s,40个循环，200的功率~
40是不是太低了点
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2楼2014-11-12 22:04:42
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小铁路

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
一个不小心就(dllchina代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-11-12 22:06:28
一般超声细胞粉碎机，买来都有一定的技术指标。超声不同的物质，量的多少，所设定的参数都会有所不同。说明书上会有个参考，但是具体条件是需要摸索的。超声时间每次时间不能过久，最好不要超过5秒，间隙时间应大于或等于超声时间，这样做是为了散热，避免长时间不间断超声温度升高破坏样品。如果细胞没有破碎的话，你需要加大功率，或者加长超声时间，超几个小时，也是很正常的。
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3楼2014-11-12 22:06:01
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