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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】超声破碎细胞问题！
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noheartman

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】超声破碎细胞问题！

在做超声破碎细胞的时候，文献上是这样写的： Sonicate in 30-s bursts while trying to keep the suspension as cold as possibile.
低温我知道，这个30-s bursts 改怎么做呢？我原来都是超声几秒再停几十秒，是不是也应该这样设置呢。如果是接连超声30秒，估计蛋白活性都死翘翘了。
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1楼 2010-08-31 12:46:16
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66suyuan

木虫 (正式写手)
破过细菌，没破过细胞....细菌的粗糙些，连续破10分钟都行！
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2楼2010-08-31 12:56:19
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小白兄

金虫 (小有名气)
可能是说总共超声30s，比如你按照超3s，间歇5s，你超10次就OK了
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时光如流水，匆匆而过。
3楼2010-08-31 14:41:19
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小白兄

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 66suyuan at 2010-08-31 12:56:19:
破过细菌，没破过细胞....细菌的粗糙些，连续破10分钟都行！

连续超10min？你超声功率多少啊？产生的热量会是蛋白变性的。
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时光如流水，匆匆而过。
4楼2010-08-31 14:42:18
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phoenix211

金虫 (小有名气)
我们实验室做的时候一般都是超声10S，停10S，做三十次。

不能一直超声10min吧，热量很多的。
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5楼2010-08-31 15:15:32
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qiqilao

银虫 (小有名气)
我们实验室一直是超声10s，停10s，5min
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6楼2010-08-31 16:15:31
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airzzy

新虫 (初入文坛)
我们实验室是超声10s，间隔放在冰上，三次
细胞很容易破碎的，确实产热很多
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7楼2010-08-31 17:32:28
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silicare

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优秀版主
★
lstt09nk(金币+1):同意~ 2010-09-03 10:01:15
这个要看超声破碎仪的功率！

不同 的机子功率是完全不同的，用过几百瓦的，也用过1千瓦的，程序都不一样

这个可千万要注意，别光看别人的条件，忽略了最重要的硬件
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8楼2010-08-31 17:46:42
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66suyuan

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 小白兄 at 2010-08-31 14:41:19:
可能是说总共超声30s，比如你按照超3s，间歇5s，你超10次就OK了

功率也不算很低，不过低温保护必须搞好！
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9楼2010-09-01 16:42:07
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~ 2010-09-03 10:07:17
引用回帖:
Originally posted by noheartman at 2010-08-31 12:46:16:
在做超声破碎细胞的时候，文献上是这样写的： Sonicate in 30-s bursts while trying to keep the suspension as cold as possibile.
低温我知道，这个30-s bursts 改怎么做呢？我原来都是超声几秒再停几十秒， ...

应该是超声的总时间（不包括停得时间），不然30s的总时间很难将细胞壁破碎完全。不过，据我的经验，3-5ml菌液在950W，27%功率，2s on,4s off，总时间5min足够破碎完全。
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10楼2010-09-01 17:02:16
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