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noheartman

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】超声破碎细胞问题!

在做超声破碎细胞的时候,文献上是这样写的: Sonicate in 30-s bursts while trying to keep the suspension as cold as possibile.
低温我知道,这个30-s bursts 改怎么做呢?我原来都是超声几秒再停几十秒,是不是也应该这样设置呢。如果是接连超声30秒,估计蛋白活性都死翘翘了。
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66suyuan

木虫 (正式写手)

破过细菌,没破过细胞....细菌的粗糙些,连续破10分钟都行!
2楼2010-08-31 12:56:19
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小白兄

金虫 (小有名气)

可能是说总共超声30s,比如你按照超3s,间歇5s,你超10次就OK了
时光如流水,匆匆而过。
3楼2010-08-31 14:41:19
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小白兄

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 66suyuan at 2010-08-31 12:56:19:
破过细菌,没破过细胞....细菌的粗糙些,连续破10分钟都行!

连续超10min?你超声功率多少啊?产生的热量会是蛋白变性的。
时光如流水,匆匆而过。
4楼2010-08-31 14:42:18
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phoenix211

金虫 (小有名气)

我们实验室做的时候一般都是超声10S,停10S,做三十次。

不能一直超声10min吧,热量很多的。
5楼2010-08-31 15:15:32
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qiqilao

银虫 (小有名气)

我们实验室一直是超声10s,停10s,5min
6楼2010-08-31 16:15:31
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airzzy

新虫 (初入文坛)

我们实验室是超声10s,间隔放在冰上,三次
细胞很容易破碎的,确实产热很多
7楼2010-08-31 17:32:28
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silicare

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lstt09nk(金币+1):同意~ 2010-09-03 10:01:15
这个要看超声破碎仪的功率!

不同 的机子功率是完全不同的,用过几百瓦的,也用过1千瓦的,程序都不一样

这个可千万要注意,别光看别人的条件,忽略了最重要的硬件
8楼2010-08-31 17:46:42
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66suyuan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 小白兄 at 2010-08-31 14:41:19:
可能是说总共超声30s,比如你按照超3s,间歇5s,你超10次就OK了

功率也不算很低,不过低温保护必须搞好!
9楼2010-09-01 16:42:07
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sqhnsd

金虫 (正式写手)


lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~ 2010-09-03 10:07:17
引用回帖:
Originally posted by noheartman at 2010-08-31 12:46:16:
在做超声破碎细胞的时候,文献上是这样写的: Sonicate in 30-s bursts while trying to keep the suspension as cold as possibile.
低温我知道,这个30-s bursts 改怎么做呢?我原来都是超声几秒再停几十秒, ...

应该是超声的总时间(不包括停得时间),不然30s的总时间很难将细胞壁破碎完全。不过,据我的经验,3-5ml菌液在950W,27%功率,2s on,4s off,总时间5min足够破碎完全。
10楼2010-09-01 17:02:16
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