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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 梯度洗脱基线波动
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Caizhua90

新虫 (初入文坛)

[求助] 梯度洗脱基线波动 已有10人参与

各位前辈，本人最近做梯度，流动相A：乙腈-0.1%磷酸（5:95），流动相B：乙腈
梯度洗脱程序：时间（min）   A%    B%
                                 0           100     0
                                 5           100     0
                                 30          20      80
                                 50          20      80
检测波长是210nm
每一针（包括空白溶剂、空针）都在29~35min这个范围内出现波动。请求各位前辈指点迷津，真的不知道是哪里的问题，会是流动相（水、乙腈）本身的问题，梯度洗脱将流动相本身的有机杂质洗脱出来？
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1楼 2014-11-11 11:54:43
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Caizhua90: 金币+1 2014-11-19 13:59:56
这个波动是梯度带来的正常情况，在短波长下更加明显。试图对其进行优化是比较难的，不过你可以优化至不影响各组分的测定那就可以了。
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
5楼2014-11-12 08:43:48
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依旧没睡醒

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
嘛，走梯度本身就容易有波动，而且楼主选取的是210，这就更难避免了，影响不大就好啦，不必过度介怀

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7楼2014-11-12 09:02:23
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Caizhua90

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by TDYHUST at 2014-11-11 13:17:16
走梯度波动时正常的   只要波动不要太厉害  也不影响峰就行

倒不会对已知杂质和主成分有影响，就怕会影响未知杂质的（样品溶液的基线在此处的波动和空白溶剂可以重叠），而且基线有下行的情况，下行幅度有80mAU左右
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11楼2014-11-19 14:02:35
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普通回帖

TDYHUST

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
走梯度波动时正常的   只要波动不要太厉害  也不影响峰就行
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2楼2014-11-11 13:17:16
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mhs236

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
梯度洗脱在后面出现波动是正常的 没关系的 只要你的目标峰不在这个范围内就好
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3楼2014-11-11 15:36:24
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Greifvogel

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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你的检测波长的问题，你用254nm就不会明显了。
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MeineEhreheisstTreue
4楼2014-11-11 23:07:11
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rgrthtrhtrh

新虫 (小有名气)
本来就可能存在波动
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6楼2014-11-12 08:49:45
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wangyj1986

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
走梯度，而且是在线混合，很容易产生气泡，噪音会大一些，波动很正常，只要在可接受的范围内，同时也不影响被测物，也是可以的。
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8楼2014-11-13 08:41:52
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nazila

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的梯度在5-35分钟内变化太大了，因为是在线混合，很容易产生气泡，噪音会大一些，是正常的，只要空白有梯度峰，供试品的图谱在此处直接扣除掉梯度峰就可以了。在加上楼主选择波长为210nm,溶剂有末端吸收也是正常的，只要空白溶剂有的峰，供试品溶液峰均可在相应位置扣除的。
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一切为了更好的生活。
9楼2014-11-13 11:00:31
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Caizhua90

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Greifvogel at 2014-11-11 23:07:11
你的检测波长的问题，你用254nm就不会明显了。

但是主成分的最大吸收波长就是210nm
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10楼2014-11-19 13:59:30
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