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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 要合成文献中的引物，但没有表明方向，只给了右引物 和左引物不知怎么合成
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吉部落zy

金虫 (小有名气)

[求助] 要合成文献中的引物，但没有表明方向，只给了右引物 和左引物不知怎么合成 已有3人参与

合成引物时需要改成3‘-5’的方向，不知道怎么合成 是直接复制还是需要改方向，求大神们指导！！

              Left primer
             Right primer
AcAtGTaTAGACCTGTAT
                ATATGGGCAAGTGCCATC
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我可以哭泣，可以悲伤，但我不可以不坚强。
1楼 2014-11-10 19:06:00
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nwsuafliu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
吉部落zy: 金币+1, ★有帮助 2014-11-12 12:04:49
直接把序列发给公司就好了。
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知识改变命运
2楼2014-11-10 21:55:55
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BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
吉部落zy: 金币+1, ★有帮助 2014-11-12 12:04:58
如果没有特别说明，都是5-3，这个是常识性的知识。
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3楼2014-11-10 23:31:19
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吉部落zy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by BioChen at 2014-11-10 23:31:19
如果没有特别说明，都是5-3，这个是常识性的知识。

可是合成之后pcr 有很多条带  我是做ssr的不知道哪个是自己的   有的还p不出来
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我可以哭泣，可以悲伤，但我不可以不坚强。
4楼2014-11-12 12:06:08
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ElinorGao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-11-13 11:21:10
用Oligo分析一下引物序列吧，也可以用OligoAnalyzer 网页版。引物5‘与3’是我们根据结合模板方向判断的，公司合成引物时两端是不做处理的，如果你引物不做标记，你写反了也没有影响，得到的结果一样。pcr 有很多条带是因为非特异扩增，你可以把退火温度提高，或者做个温度梯度，如果还不行，就是引物设计或合成有问题，文献的东西不可尽信。
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5楼2014-11-12 16:36:44
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吉部落zy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ElinorGao at 2014-11-12 16:36:44
用Oligo分析一下引物序列吧，也可以用OligoAnalyzer 网页版。引物5‘与3’是我们根据结合模板方向判断的，公司合成引物时两端是不做处理的，如果你引物不做标记，你写反了也没有影响，得到的结果一样。pcr 有很多条 ...

我是微卫星标记 不知道有没有影响
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我可以哭泣，可以悲伤，但我不可以不坚强。
6楼2014-11-13 13:50:31
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