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等价交换fafu

铜虫 (小有名气)

[求助] 10kb长片段pcr参数该设置什么 已有3人参与

pcr模板设计是根据几个豆科模式作物设计的,待扩增的DNA是花生叶子中提取的,序列位置,根据BLAST预计有10kb以上,pcr的温度和时间参数怎么设置
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caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-03 15:10:34
这个问题好奇怪啊,PCR的程序与所用的酶,引物的TM值,片段的长度都有关系,没有人比你更清楚这些内容了。
3楼2014-11-02 23:39:28
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wshi85

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
为什不不选择分段?
很久没在虫虫上漂游了,觉得回归虫虫!
2楼2014-11-02 21:06:08
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-03 15:10:37
建议你选择long and accurate PCR Kit,说明书中有关于长片段PCR引物设计的相关参数以及反映体系和反应条件的设置。10 kb的片段长度普通的酶扩增不出来的
rainwater
4楼2014-11-03 11:30:34
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