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等价交换fafu

铜虫 (小有名气)

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[求助] 10kb长片段pcr参数该设置什么已有3人参与

pcr模板设计是根据几个豆科模式作物设计的，待扩增的DNA是花生叶子中提取的，序列位置，根据BLAST预计有10kb以上，pcr的温度和时间参数怎么设置

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1楼2014-11-01 14:54:58

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wshi85

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

为什不不选择分段？

很久没在虫虫上漂游了，觉得回归虫虫！

2楼2014-11-02 21:06:08

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caihang

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-03 15:10:34

这个问题好奇怪啊，PCR的程序与所用的酶，引物的TM值，片段的长度都有关系，没有人比你更清楚这些内容了。

3楼2014-11-02 23:39:28

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zhangyunjing

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【答案】应助回帖

★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-03 15:10:37

建议你选择long and accurate PCR Kit，说明书中有关于长片段PCR引物设计的相关参数以及反映体系和反应条件的设置。10 kb的片段长度普通的酶扩增不出来的

rainwater

4楼2014-11-03 11:30:34

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